动物医学进展
動物醫學進展
동물의학진전
PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
2012年
6期
27-31
,共5页
李东卫%郭莹莹%刘在斯%王世达%沈楠%文辉强%焦同路%王靖飞
李東衛%郭瑩瑩%劉在斯%王世達%瀋楠%文輝彊%焦同路%王靖飛
리동위%곽형형%류재사%왕세체%침남%문휘강%초동로%왕정비
禽流感病毒,NS1蛋白%杆状病毒表达载体系统%蛋白纯化
禽流感病毒,NS1蛋白%桿狀病毒錶達載體繫統%蛋白純化
금류감병독,NS1단백%간상병독표체재체계통%단백순화
为获得纯化的禽流感病毒(AIV)的NS1蛋白,将A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)( CK/GX/10/99) NS1全长核苷酸克隆至杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,构建了重组转移载体pFastBacHTA-NS1,然后转化入DH10Bac感受态细胞中制备重组杆粒,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得表达NS1基因的重组杆状病毒.用重组杆状病毒转染昆虫细胞sf9进行NS1蛋白的表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot、间接免疫荧光(IFA)对表达的目标蛋白进行分析.结果表明,构建了含NS1基因的重组杆状病毒,分子质量约30 ku的重组蛋白得到了表达,为NS1的相关功能研究奠定了基础.
為穫得純化的禽流感病毒(AIV)的NS1蛋白,將A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)( CK/GX/10/99) NS1全長覈苷痠剋隆至桿狀病毒轉移載體pFastBacHTA中,構建瞭重組轉移載體pFastBacHTA-NS1,然後轉化入DH10Bac感受態細胞中製備重組桿粒,在脂質體介導下轉染sf9昆蟲細胞,穫得錶達NS1基因的重組桿狀病毒.用重組桿狀病毒轉染昆蟲細胞sf9進行NS1蛋白的錶達,通過SDS-PAGE電泳、Western blot、間接免疫熒光(IFA)對錶達的目標蛋白進行分析.結果錶明,構建瞭含NS1基因的重組桿狀病毒,分子質量約30 ku的重組蛋白得到瞭錶達,為NS1的相關功能研究奠定瞭基礎.
위획득순화적금류감병독(AIV)적NS1단백,장A/chicken/Guangxi/10/99(H9N2)( CK/GX/10/99) NS1전장핵감산극륭지간상병독전이재체pFastBacHTA중,구건료중조전이재체pFastBacHTA-NS1,연후전화입DH10Bac감수태세포중제비중조간립,재지질체개도하전염sf9곤충세포,획득표체NS1기인적중조간상병독.용중조간상병독전염곤충세포sf9진행NS1단백적표체,통과SDS-PAGE전영、Western blot、간접면역형광(IFA)대표체적목표단백진행분석.결과표명,구건료함NS1기인적중조간상병독,분자질량약30 ku적중조단백득도료표체,위NS1적상관공능연구전정료기출.
