CAJ | 학술논문

目的构建带TLR4信号肽的增强型青色荧光蛋白(pECFP-C1-SP)和增强型黄色荧光蛋白(pEYFP-C1-SP)的质粒载体,为使用荧光共振能量转移(FRET)技术研究LPS在细胞膜上的受体识别机制提供依据.方法采用点突变技术构建了带TLR4信号肽的载体,用脂质体瞬时转染NIH3T3细胞,观察带信号肽载体和融合蛋白载体在细胞内的表达.结果DNA测序证明所构建的带TLR4信号肽的载体正确;酶切和DNA测序表明融合蛋白载体的构建正确,TLR4信号肽可以使蛋白主要表达在膜上.结论所构建的带信号肽的荧光蛋白载体是正确的,pECFP-Cl-SP和pEYFP-C1-SP能够表达在细胞膜上,可有效地应用于膜蛋白相互作用的研究.
목적구건대TLR4신호태적증강형청색형광단백(pECFP-C1-SP)화증강형황색형광단백(pEYFP-C1-SP)적질립재체,위사용형광공진능량전이(FRET)기술연구LPS재세포막상적수체식별궤제제공의거.방법채용점돌변기술구건료대TLR4신호태적재체,용지질체순시전염NIH3T3세포,관찰대신호태재체화융합단백재체재세포내적표체.결과DNA측서증명소구건적대TLR4신호태적재체정학;매절화DNA측서표명융합단백재체적구건정학,TLR4신호태가이사단백주요표체재막상.결론소구건적대신호태적형광단백재체시정학적,pECFP-Cl-SP화pEYFP-C1-SP능구표체재세포막상,가유효지응용우막단백상호작용적연구.