第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2004年
3期
201-203
,共3页
张菊%陈中灿%白玉杰%高艳娥%何玉宪%阎小君
張菊%陳中燦%白玉傑%高豔娥%何玉憲%閻小君
장국%진중찬%백옥걸%고염아%하옥헌%염소군
人乳头瘤病毒58%宫颈肿瘤%基因/表达
人乳頭瘤病毒58%宮頸腫瘤%基因/錶達
인유두류병독58%궁경종류%기인/표체
目的:获得含人乳头瘤病毒(HPV)58型E6基因的克隆及表达重组体并体外表达E6蛋白. 方法:聚合酶链方法从1例宫颈腺癌患者癌组织DNA中获得HPV58 E6基因,并将其与克隆载体pGEM-T Easy连接,获得重组体HPV58-E6-pGEM-T,继之以双酶切将E6基因与同样双酶切的线性化的pRSET-A表达载体连接,得到E6表达重组体pRSET-58E6,转化E.coli BL21(DE3),用IPTG诱导表达. 结果:从1例宫颈癌患者中成功获得了少见HPV58型的E6基因并构建了其重组表达载体. 经IPTG诱导后可表达Mr 24 000的6His HPV58 E6融合蛋白,表达量占菌体蛋白的10%. 结论:成功获得了少见HPV58高危型的E6基因,并可在E.coli中高效表达.
目的:穫得含人乳頭瘤病毒(HPV)58型E6基因的剋隆及錶達重組體併體外錶達E6蛋白. 方法:聚閤酶鏈方法從1例宮頸腺癌患者癌組織DNA中穫得HPV58 E6基因,併將其與剋隆載體pGEM-T Easy連接,穫得重組體HPV58-E6-pGEM-T,繼之以雙酶切將E6基因與同樣雙酶切的線性化的pRSET-A錶達載體連接,得到E6錶達重組體pRSET-58E6,轉化E.coli BL21(DE3),用IPTG誘導錶達. 結果:從1例宮頸癌患者中成功穫得瞭少見HPV58型的E6基因併構建瞭其重組錶達載體. 經IPTG誘導後可錶達Mr 24 000的6His HPV58 E6融閤蛋白,錶達量佔菌體蛋白的10%. 結論:成功穫得瞭少見HPV58高危型的E6基因,併可在E.coli中高效錶達.
목적:획득함인유두류병독(HPV)58형E6기인적극륭급표체중조체병체외표체E6단백. 방법:취합매련방법종1례궁경선암환자암조직DNA중획득HPV58 E6기인,병장기여극륭재체pGEM-T Easy련접,획득중조체HPV58-E6-pGEM-T,계지이쌍매절장E6기인여동양쌍매절적선성화적pRSET-A표체재체련접,득도E6표체중조체pRSET-58E6,전화E.coli BL21(DE3),용IPTG유도표체. 결과:종1례궁경암환자중성공획득료소견HPV58형적E6기인병구건료기중조표체재체. 경IPTG유도후가표체Mr 24 000적6His HPV58 E6융합단백,표체량점균체단백적10%. 결론:성공획득료소견HPV58고위형적E6기인,병가재E.coli중고효표체.