交通医学
交通醫學
교통의학
MEDICAL JOURNAL OF COMMUNICATIONS
2007年
1期
14-16
,共3页
王行%王惠民%王旭东%鞠少卿%祝文彩%张冬雷
王行%王惠民%王旭東%鞠少卿%祝文綵%張鼕雷
왕행%왕혜민%왕욱동%국소경%축문채%장동뢰
增殖诱导配体%聚合酶链反应%质粒标准品%T-A克隆
增殖誘導配體%聚閤酶鏈反應%質粒標準品%T-A剋隆
증식유도배체%취합매련반응%질립표준품%T-A극륭
目的:构建增殖诱导配体(APRIL)基因的重组质粒的标准品.方法:从肺癌的组织标本中抽提总RNA逆转录合成cDNA,以cDNA为模板扩增目的片段,从胶中回收目的片段,再将回收的目的片段与pGEM-T Easy载体连接并转化宿主菌DH-5α,分别用菌落PCR及测序两种方法证实目的片段已成功转染细菌.抽提重组质粒DNA用核酸分析仪测浓度后换算成copies/ml.结果:成功构建了APRIL实时荧光定量标准品的线性范围105～1012copies/ml,批内与批间CV分别为1.34%～3.07%和7.24%～11.41%.结论:该法制备的质粒标准品具有较好的灵敏度和重复性,满足实时荧光定量实验要求.
目的:構建增殖誘導配體(APRIL)基因的重組質粒的標準品.方法:從肺癌的組織標本中抽提總RNA逆轉錄閤成cDNA,以cDNA為模闆擴增目的片段,從膠中迴收目的片段,再將迴收的目的片段與pGEM-T Easy載體連接併轉化宿主菌DH-5α,分彆用菌落PCR及測序兩種方法證實目的片段已成功轉染細菌.抽提重組質粒DNA用覈痠分析儀測濃度後換算成copies/ml.結果:成功構建瞭APRIL實時熒光定量標準品的線性範圍105～1012copies/ml,批內與批間CV分彆為1.34%～3.07%和7.24%～11.41%.結論:該法製備的質粒標準品具有較好的靈敏度和重複性,滿足實時熒光定量實驗要求.
목적:구건증식유도배체(APRIL)기인적중조질립적표준품.방법:종폐암적조직표본중추제총RNA역전록합성cDNA,이cDNA위모판확증목적편단,종효중회수목적편단,재장회수적목적편단여pGEM-T Easy재체련접병전화숙주균DH-5α,분별용균락PCR급측서량충방법증실목적편단이성공전염세균.추제중조질립DNA용핵산분석의측농도후환산성copies/ml.결과:성공구건료APRIL실시형광정량표준품적선성범위105～1012copies/ml,비내여비간CV분별위1.34%～3.07%화7.24%～11.41%.결론:해법제비적질립표준품구유교호적령민도화중복성,만족실시형광정량실험요구.
