解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2007年
1期
102-106
,共5页
神经干细胞%分化%细胞培养%免疫细胞化学%人胚胎
神經榦細胞%分化%細胞培養%免疫細胞化學%人胚胎
신경간세포%분화%세포배양%면역세포화학%인배태
目的 比较不同时间点人胚胎脑神经干细胞分化为神经元和胶质细胞的比例.方法 取胎龄8～12 周的人胚胎脑海马,机械分离成单细胞悬液,以2×106 个细胞/ml接种到含h-EGF、h-bFGF和h-LIF的DMEM/F12培养液中.用1%FBS诱导神经干细胞球分化,12 h后行RNA-结合蛋白(musashil)免疫细胞化学鉴定,分别在2、5、7、14和23 d时行β-Ⅲ微管蛋白(β-Ⅲ Tubulin/Tuj1)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和半乳糖脑苷脂(galc)免疫细胞化学鉴定.结果 诱导分化12 h时细胞球中绝大部分细胞为Musashil阳性细胞,第2 d时有少量的β-ⅢTubulin和GFAP阳性细胞,未见galc阳性细胞;第7 d时β-Ⅲ Tubulin阳性细胞数目最多,约为细胞总数的48.2%,以后逐渐下降,而GFAP阳性细胞数目在第2～23 d内呈逐渐增加趋势,到第23 d时达细胞总数的65.3%;随分化时间延长,只能检测到极少量的galc阳性细胞.结论 1%FBS可促使人神经干细胞分化为中枢神经系统的3种主要细胞类型,且其分化为神经元和胶质细胞的比例在不同时间点上有显著差异.
目的 比較不同時間點人胚胎腦神經榦細胞分化為神經元和膠質細胞的比例.方法 取胎齡8～12 週的人胚胎腦海馬,機械分離成單細胞懸液,以2×106 箇細胞/ml接種到含h-EGF、h-bFGF和h-LIF的DMEM/F12培養液中.用1%FBS誘導神經榦細胞毬分化,12 h後行RNA-結閤蛋白(musashil)免疫細胞化學鑒定,分彆在2、5、7、14和23 d時行β-Ⅲ微管蛋白(β-Ⅲ Tubulin/Tuj1)、膠質原纖維痠性蛋白(GFAP)和半乳糖腦苷脂(galc)免疫細胞化學鑒定.結果 誘導分化12 h時細胞毬中絕大部分細胞為Musashil暘性細胞,第2 d時有少量的β-ⅢTubulin和GFAP暘性細胞,未見galc暘性細胞;第7 d時β-Ⅲ Tubulin暘性細胞數目最多,約為細胞總數的48.2%,以後逐漸下降,而GFAP暘性細胞數目在第2～23 d內呈逐漸增加趨勢,到第23 d時達細胞總數的65.3%;隨分化時間延長,隻能檢測到極少量的galc暘性細胞.結論 1%FBS可促使人神經榦細胞分化為中樞神經繫統的3種主要細胞類型,且其分化為神經元和膠質細胞的比例在不同時間點上有顯著差異.
목적 비교불동시간점인배태뇌신경간세포분화위신경원화효질세포적비례.방법 취태령8～12 주적인배태뇌해마,궤계분리성단세포현액,이2×106 개세포/ml접충도함h-EGF、h-bFGF화h-LIF적DMEM/F12배양액중.용1%FBS유도신경간세포구분화,12 h후행RNA-결합단백(musashil)면역세포화학감정,분별재2、5、7、14화23 d시행β-Ⅲ미관단백(β-Ⅲ Tubulin/Tuj1)、효질원섬유산성단백(GFAP)화반유당뇌감지(galc)면역세포화학감정.결과 유도분화12 h시세포구중절대부분세포위Musashil양성세포,제2 d시유소량적β-ⅢTubulin화GFAP양성세포,미견galc양성세포;제7 d시β-Ⅲ Tubulin양성세포수목최다,약위세포총수적48.2%,이후축점하강,이GFAP양성세포수목재제2～23 d내정축점증가추세,도제23 d시체세포총수적65.3%;수분화시간연장,지능검측도겁소량적galc양성세포.결론 1%FBS가촉사인신경간세포분화위중추신경계통적3충주요세포류형,차기분화위신경원화효질세포적비례재불동시간점상유현저차이.
