CAJ | 학술논문

目的:探讨RNA干扰enolase-1基因对人胃癌的治疗作用.方法:根据enolase-lmRNA序列构建表达enolaae-1特异的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达质粒pMSCVU6/ENO-lsil,pMSCVU6/ENO1si2,pMSCVU6/ENO-1si3.种植人胃癌SGC-7901细胞于裸鼠皮下建立裸鼠肿瘤模型.将构建成功的三种siRNA质粒分别转染SGC-7901细胞株.pMSCVU6/ENO-1si2和pMSCVU6/ENO-1si3转染裸鼠瘤体内.MTT法检测SGC-7901细胞增殖状况;测量荷瘤裸鼠的肿瘤体积,计算抑瘤率;RT-PCR检测SGC-7901细胞enolase-1mRNA表达;分别以免疫组化SP法和Western blot检测体内外enolage-1蛋白表达.结果:SGC-7901细胞株及裸鼠瘤体均被所采用的质粒成功转染.SGC-7901细胞受pMSCVU6/ENO-1si2转染后,其生长活性受到明显抑制(P＜0.01),enolabe1mRNA及蛋白表达显著降低(P＜0.01).体内抑瘤实验表明,pMSCVU6/ENO-1si2组平均瘤体积为(380±26)mm3,pMSCVU6/ENO-1si3组与空白对照组分别为(993±124)mm3和(1102±131)mm3;pMSCVU6/ENO-1si2组抑瘤率为65.52%.pMSCVU6/ENO-1si3组为9.89%;pMSCVU6/ENO-1si2组肿瘤体积明显小于pMSCVU6/ENO-1si3组和空白对照组,差异具有显著性(P＜0.01);pMSCVU6/ENO-1si3组和空白对照组之间肿瘤体积无显著差异(P＞0.05);pM-SCVU6/ENO-1si2组与pMSCVU6/ENO-1si3组和空白对照组相比,enolase-1蛋白表达减弱.结论:表达siRNA的enolase-1基因特异的真核表达质粒能成功转染体内、外胃癌细胞.其中pMSCVU6/ENO-1si2可有效抑制人胃癌细胞的生长.
목적:탐토RNA간우enolase-1기인대인위암적치료작용.방법:근거enolase-lmRNA서렬구건표체enolaae-1특이적소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)진핵표체질립pMSCVU6/ENO-lsil,pMSCVU6/ENO1si2,pMSCVU6/ENO-1si3.충식인위암SGC-7901세포우라서피하건립라서종류모형.장구건성공적삼충siRNA질립분별전염SGC-7901세포주.pMSCVU6/ENO-1si2화pMSCVU6/ENO-1si3전염라서류체내.MTT법검측SGC-7901세포증식상황;측량하류라서적종류체적,계산억류솔;RT-PCR검측SGC-7901세포enolase-1mRNA표체;분별이면역조화SP법화Western blot검측체내외enolage-1단백표체.결과:SGC-7901세포주급라서류체균피소채용적질립성공전염.SGC-7901세포수pMSCVU6/ENO-1si2전염후,기생장활성수도명현억제(P＜0.01),enolabe1mRNA급단백표체현저강저(P＜0.01).체내억류실험표명,pMSCVU6/ENO-1si2조평균류체적위(380±26)mm3,pMSCVU6/ENO-1si3조여공백대조조분별위(993±124)mm3화(1102±131)mm3;pMSCVU6/ENO-1si2조억류솔위65.52%.pMSCVU6/ENO-1si3조위9.89%;pMSCVU6/ENO-1si2조종류체적명현소우pMSCVU6/ENO-1si3조화공백대조조,차이구유현저성(P＜0.01);pMSCVU6/ENO-1si3조화공백대조조지간종류체적무현저차이(P＞0.05);pM-SCVU6/ENO-1si2조여pMSCVU6/ENO-1si3조화공백대조조상비,enolase-1단백표체감약.결론:표체siRNA적enolase-1기인특이적진핵표체질립능성공전염체내、외위암세포.기중pMSCVU6/ENO-1si2가유효억제인위암세포적생장.