草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2009年
3期
117-125
,共9页
豌豆清蛋白(PA1)基因%富硫氨基酸%苜蓿%遗传转化
豌豆清蛋白(PA1)基因%富硫氨基痠%苜蓿%遺傳轉化
완두청단백(PA1)기인%부류안기산%목숙%유전전화
本研究用PCR方法从豌豆(食荚大菜豌)克隆出富含硫氨基酸、同时具有抗虫作用的双功能的蛋白质基因-豌豆清蛋白1(PA1)基因,并构建了植物表达载体pCAMBIAl301-PA1.采用农杆菌介导法转化了紫花苜蓿,并对其转化体系进行了优化,得到了多个转基因胚性愈伤组织及其再生植株.PCR和Southern杂交检测表明,PA1基因和潮霉素抗性基因已被整合到了宿主细胞.SDS-PAGE分析表明该基因在再生植株中有一定表达.游离氨基酸分析表明,PA1基因的表达转基因苜蓿中蛋氨酸和半胱氨酸的含量从0.1%提高到0.4%.
本研究用PCR方法從豌豆(食莢大菜豌)剋隆齣富含硫氨基痠、同時具有抗蟲作用的雙功能的蛋白質基因-豌豆清蛋白1(PA1)基因,併構建瞭植物錶達載體pCAMBIAl301-PA1.採用農桿菌介導法轉化瞭紫花苜蓿,併對其轉化體繫進行瞭優化,得到瞭多箇轉基因胚性愈傷組織及其再生植株.PCR和Southern雜交檢測錶明,PA1基因和潮黴素抗性基因已被整閤到瞭宿主細胞.SDS-PAGE分析錶明該基因在再生植株中有一定錶達.遊離氨基痠分析錶明,PA1基因的錶達轉基因苜蓿中蛋氨痠和半胱氨痠的含量從0.1%提高到0.4%.
본연구용PCR방법종완두(식협대채완)극륭출부함류안기산、동시구유항충작용적쌍공능적단백질기인-완두청단백1(PA1)기인,병구건료식물표체재체pCAMBIAl301-PA1.채용농간균개도법전화료자화목숙,병대기전화체계진행료우화,득도료다개전기인배성유상조직급기재생식주.PCR화Southern잡교검측표명,PA1기인화조매소항성기인이피정합도료숙주세포.SDS-PAGE분석표명해기인재재생식주중유일정표체.유리안기산분석표명,PA1기인적표체전기인목숙중단안산화반광안산적함량종0.1%제고도0.4%.
