福建农业学报
福建農業學報
복건농업학보
FUJIAN JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
2期
124-129
,共6页
张琳%胡北侠%颜世敢%杨少华%许传田%张秀美
張琳%鬍北俠%顏世敢%楊少華%許傳田%張秀美
장림%호북협%안세감%양소화%허전전%장수미
黄病毒%通用引物%巢式PCR%鸭%敏感性
黃病毒%通用引物%巢式PCR%鴨%敏感性
황병독%통용인물%소식PCR%압%민감성
参照GeneBank已登录的黄病毒基因序列设计通用引物,建立基于黄病毒通用引物的巢式PCR检测体系,为黄病毒特别是新发黄病毒提供了高效的检测方法.该方法通过基因组的比对,选择NS5基因保守区设计了4条通用简并引物Flav P1～Flav P4,在此基础上建立了巢式PCR反应体系,并应用到鸭黄病毒的检测中.该体系仅能扩增鸭黄病毒目的基因而不能扩增其他病毒,且敏感性达到90 copies·μL-1,比普通PCR高出1 000倍.同源性和进化分析表明,鸭黄病毒属蚊媒黄病毒类恩塔亚病毒群,与坦布苏病毒及近期发现的BYD病毒关系最近.以上结果表明,设计的黄病毒引物具有良好的通用性和特异性,其巢式PCR敏感性高,该体系成功地进行了鸭黄病毒的检测,验证了该方法的敏感性和特异性.
參照GeneBank已登錄的黃病毒基因序列設計通用引物,建立基于黃病毒通用引物的巢式PCR檢測體繫,為黃病毒特彆是新髮黃病毒提供瞭高效的檢測方法.該方法通過基因組的比對,選擇NS5基因保守區設計瞭4條通用簡併引物Flav P1～Flav P4,在此基礎上建立瞭巢式PCR反應體繫,併應用到鴨黃病毒的檢測中.該體繫僅能擴增鴨黃病毒目的基因而不能擴增其他病毒,且敏感性達到90 copies·μL-1,比普通PCR高齣1 000倍.同源性和進化分析錶明,鴨黃病毒屬蚊媒黃病毒類恩塔亞病毒群,與坦佈囌病毒及近期髮現的BYD病毒關繫最近.以上結果錶明,設計的黃病毒引物具有良好的通用性和特異性,其巢式PCR敏感性高,該體繫成功地進行瞭鴨黃病毒的檢測,驗證瞭該方法的敏感性和特異性.
삼조GeneBank이등록적황병독기인서렬설계통용인물,건립기우황병독통용인물적소식PCR검측체계,위황병독특별시신발황병독제공료고효적검측방법.해방법통과기인조적비대,선택NS5기인보수구설계료4조통용간병인물Flav P1～Flav P4,재차기출상건립료소식PCR반응체계,병응용도압황병독적검측중.해체계부능확증압황병독목적기인이불능확증기타병독,차민감성체도90 copies·μL-1,비보통PCR고출1 000배.동원성화진화분석표명,압황병독속문매황병독류은탑아병독군,여탄포소병독급근기발현적BYD병독관계최근.이상결과표명,설계적황병독인물구유량호적통용성화특이성,기소식PCR민감성고,해체계성공지진행료압황병독적검측,험증료해방법적민감성화특이성.
