中华创伤骨科杂志
中華創傷骨科雜誌
중화창상골과잡지
CHINESE JOURNAL OF ORTHOPAEDIC TRAUMA
2006年
11期
1062-1066
,共5页
王琳%刘德瑜%石心泉%裴开颜%李东%贾孟春
王琳%劉德瑜%石心泉%裴開顏%李東%賈孟春
왕림%류덕유%석심천%배개안%리동%가맹춘
骨髓基质干细胞%基因表达%实时荧光定量RT-PCR
骨髓基質榦細胞%基因錶達%實時熒光定量RT-PCR
골수기질간세포%기인표체%실시형광정량RT-PCR
目的 体外培养小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)诱导分化为成骨细胞,定量分析其骨生成关键标志基因的表达水平.方法 体外培养小鼠BMSCs 7、14、21 d,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)和骨唾液酸蛋白(BSP)基因的表达水平.结果 小鼠BMSCs体外稳定增殖和分化,Ⅰ型胶原培养14 d和21 d mRNA水平分别是培养7 d时的0.75±0.04倍和(0.34±0.03)倍;ALP、OPN和BSP基因表达水平随着培养时间延长而上升,其中培养21 d时的ALP、OPN和BSP mRNA水平分别是培养7 d时的(19.70±2.36)倍、(150.12±9.31)倍和(7.73±0.58)倍.结论 荧光定量RT-PCR可以灵敏地检测成骨细胞关键标志基因表达水平,随着培养时间延长,Ⅰ型胶原的表达水平逐渐下降,而ALP、OPN和BSP的表达水平显著上升.
目的 體外培養小鼠骨髓基質榦細胞(BMSCs)誘導分化為成骨細胞,定量分析其骨生成關鍵標誌基因的錶達水平.方法 體外培養小鼠BMSCs 7、14、21 d,提取細胞總RNA,採用實時熒光定量RT-PCR方法檢測Ⅰ型膠原、堿性燐痠酶(ALP)、骨橋蛋白(OPN)和骨唾液痠蛋白(BSP)基因的錶達水平.結果 小鼠BMSCs體外穩定增殖和分化,Ⅰ型膠原培養14 d和21 d mRNA水平分彆是培養7 d時的0.75±0.04倍和(0.34±0.03)倍;ALP、OPN和BSP基因錶達水平隨著培養時間延長而上升,其中培養21 d時的ALP、OPN和BSP mRNA水平分彆是培養7 d時的(19.70±2.36)倍、(150.12±9.31)倍和(7.73±0.58)倍.結論 熒光定量RT-PCR可以靈敏地檢測成骨細胞關鍵標誌基因錶達水平,隨著培養時間延長,Ⅰ型膠原的錶達水平逐漸下降,而ALP、OPN和BSP的錶達水平顯著上升.
목적 체외배양소서골수기질간세포(BMSCs)유도분화위성골세포,정량분석기골생성관건표지기인적표체수평.방법 체외배양소서BMSCs 7、14、21 d,제취세포총RNA,채용실시형광정량RT-PCR방법검측Ⅰ형효원、감성린산매(ALP)、골교단백(OPN)화골타액산단백(BSP)기인적표체수평.결과 소서BMSCs체외은정증식화분화,Ⅰ형효원배양14 d화21 d mRNA수평분별시배양7 d시적0.75±0.04배화(0.34±0.03)배;ALP、OPN화BSP기인표체수평수착배양시간연장이상승,기중배양21 d시적ALP、OPN화BSP mRNA수평분별시배양7 d시적(19.70±2.36)배、(150.12±9.31)배화(7.73±0.58)배.결론 형광정량RT-PCR가이령민지검측성골세포관건표지기인표체수평,수착배양시간연장,Ⅰ형효원적표체수평축점하강,이ALP、OPN화BSP적표체수평현저상승.
