中华皮肤科杂志
中華皮膚科雜誌
중화피부과잡지
Chinese Journal of Dermatology
2003年
5期
264-266
,共3页
季明春%严华%陈红菊%申厚凤
季明春%嚴華%陳紅菊%申厚鳳
계명춘%엄화%진홍국%신후봉
奈瑟球菌,淋病%药物耐受,细菌%抑制性消减杂交%基因文库%序列分析,DNA
奈瑟毬菌,淋病%藥物耐受,細菌%抑製性消減雜交%基因文庫%序列分析,DNA
내슬구균,임병%약물내수,세균%억제성소감잡교%기인문고%서렬분석,DNA
目的克隆和研究耐药性淋球菌相关基因.方法从耐药淋球菌株RSM292C4和淋球菌标准参考菌株WHO-A细胞中提取DNA,经Rsa Ⅰ酶切后,应用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌差异DNA消减文库并进行初步筛选.结果耐药淋球菌差异DNA消减文库经扩增获得约2 500个白色克隆,随机挑取96个白色克隆,进行PCR扩增鉴定,发现克隆中插有100～600 bp大小的片段.分别以RsaI酶切样本和参照DNA为探针,与随机挑取的96个白色菌落质粒作点杂交,有5个克隆仅能与样本DNA探针杂交,而不能与参照DNA探针杂交,表明它们为RSM292C4基因组DNA所特有,可能代表某些淋球菌新基因.对这5个克隆插入的DNA片段进行测序,经送基因库和淋球菌基因组部分测序基因库检索分析,发现5个片段均为未知新序列.结论淋球菌耐药菌株DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆淋球菌耐药的新基因奠定了基础.
目的剋隆和研究耐藥性淋毬菌相關基因.方法從耐藥淋毬菌株RSM292C4和淋毬菌標準參攷菌株WHO-A細胞中提取DNA,經Rsa Ⅰ酶切後,應用抑製性消減雜交技術構建耐藥性淋毬菌差異DNA消減文庫併進行初步篩選.結果耐藥淋毬菌差異DNA消減文庫經擴增穫得約2 500箇白色剋隆,隨機挑取96箇白色剋隆,進行PCR擴增鑒定,髮現剋隆中插有100～600 bp大小的片段.分彆以RsaI酶切樣本和參照DNA為探針,與隨機挑取的96箇白色菌落質粒作點雜交,有5箇剋隆僅能與樣本DNA探針雜交,而不能與參照DNA探針雜交,錶明它們為RSM292C4基因組DNA所特有,可能代錶某些淋毬菌新基因.對這5箇剋隆插入的DNA片段進行測序,經送基因庫和淋毬菌基因組部分測序基因庫檢索分析,髮現5箇片段均為未知新序列.結論淋毬菌耐藥菌株DNA消減文庫的構建為進一步篩選、剋隆淋毬菌耐藥的新基因奠定瞭基礎.
목적극륭화연구내약성림구균상관기인.방법종내약림구균주RSM292C4화림구균표준삼고균주WHO-A세포중제취DNA,경Rsa Ⅰ매절후,응용억제성소감잡교기술구건내약성림구균차이DNA소감문고병진행초보사선.결과내약림구균차이DNA소감문고경확증획득약2 500개백색극륭,수궤도취96개백색극륭,진행PCR확증감정,발현극륭중삽유100～600 bp대소적편단.분별이RsaI매절양본화삼조DNA위탐침,여수궤도취적96개백색균락질립작점잡교,유5개극륭부능여양본DNA탐침잡교,이불능여삼조DNA탐침잡교,표명타문위RSM292C4기인조DNA소특유,가능대표모사림구균신기인.대저5개극륭삽입적DNA편단진행측서,경송기인고화림구균기인조부분측서기인고검색분석,발현5개편단균위미지신서렬.결론림구균내약균주DNA소감문고적구건위진일보사선、극륭림구균내약적신기인전정료기출.
