浙江林业科技
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절강임업과기
JOURNAL OF ZHEJIANG FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2001年
3期
16-18,102
,共4页
翁尧富%陈源%郑康乐%赵勇春%张建忠%廖石水
翁堯富%陳源%鄭康樂%趙勇春%張建忠%廖石水
옹요부%진원%정강악%조용춘%장건충%료석수
板栗%RAPD反应体系%品种(无性系)鉴别%DNA指纹图谱
闆慄%RAPD反應體繫%品種(無性繫)鑒彆%DNA指紋圖譜
판률%RAPD반응체계%품충(무성계)감별%DNA지문도보
在RAPD反应中,有许多影响结果的稳定性和准确性.本项研究采用浙江省8个板栗主栽品种(无性系),对RAPD各种反应条件进行了探索,结果表明,板栗理想的反应体系为:20μl反应体积含有100mmol/L Tris-Hcl,500mmo1/LKCl,20mmol/LMgCL2,0.01%Gelatin,dATP、dTTP、dCTP、dGTP的量各为100μmol/L,50~200ng引物,0.75～1.0单位Taq酶,2～10 ng模板DNA.反应条件为:94℃预变性2min,再94℃30s、40℃30s、72℃1.5min扩增38个循环;最后在72℃延伸7min.应用上述反应体系进行板栗RAPD反应,扩增产物在1.0%琼脂糖凝胶中电泳,经EB染色后在紫外灯下观察照相,可获得满意的DNA指纹图谱.
在RAPD反應中,有許多影響結果的穩定性和準確性.本項研究採用浙江省8箇闆慄主栽品種(無性繫),對RAPD各種反應條件進行瞭探索,結果錶明,闆慄理想的反應體繫為:20μl反應體積含有100mmol/L Tris-Hcl,500mmo1/LKCl,20mmol/LMgCL2,0.01%Gelatin,dATP、dTTP、dCTP、dGTP的量各為100μmol/L,50~200ng引物,0.75～1.0單位Taq酶,2～10 ng模闆DNA.反應條件為:94℃預變性2min,再94℃30s、40℃30s、72℃1.5min擴增38箇循環;最後在72℃延伸7min.應用上述反應體繫進行闆慄RAPD反應,擴增產物在1.0%瓊脂糖凝膠中電泳,經EB染色後在紫外燈下觀察照相,可穫得滿意的DNA指紋圖譜.
재RAPD반응중,유허다영향결과적은정성화준학성.본항연구채용절강성8개판률주재품충(무성계),대RAPD각충반응조건진행료탐색,결과표명,판률이상적반응체계위:20μl반응체적함유100mmol/L Tris-Hcl,500mmo1/LKCl,20mmol/LMgCL2,0.01%Gelatin,dATP、dTTP、dCTP、dGTP적량각위100μmol/L,50~200ng인물,0.75～1.0단위Taq매,2～10 ng모판DNA.반응조건위:94℃예변성2min,재94℃30s、40℃30s、72℃1.5min확증38개순배;최후재72℃연신7min.응용상술반응체계진행판률RAPD반응,확증산물재1.0%경지당응효중전영,경EB염색후재자외등하관찰조상,가획득만의적DNA지문도보.
