CAJ | 학술논문

目的:探索3-(4-溴苯基)-2-(乙砜基)-6-甲基喹喔啉-1,4-二氧化物(Q39)在缺氧条件下诱导人白血病K562细胞凋亡的作用机制.方法:①MTT法测定Q39对K562细胞的体外抑制作用,计算其半数抑制浓度(IC50).②4,6-Diamidino-2-Phenylindole(DAPI)荧光染料染色观察细胞的凋亡情况.③流式细胞术测定K562细胞凋亡率.④JC-1染色法观察Q39对K562细胞线粒体膜电位(△ψm)的影响.⑤Western-blotting法检测低氧条件下细胞内procaspase-3、cleaved caspase -3、PARP、Bax、Bcl-2和HIF-1α蛋白表达的变化.结果:在缺氧(3%O2)条件下,Q39对K562细胞表现出较强的体外抑制增殖作用,IC50为(0.21±0.05)μmol/L.经DAPI染色证实,Q39作用6 h后开始诱导K562细胞凋亡,后期细胞体积缩小,并出现凋亡小体.流式细胞术结果显示:K562细胞与Q39共孵育0、6、12和24 h的凋亡率分别为2.8%、3.2%、5.9%和19.2%.JC-1染色实验结果显示:孵育0、6、12、24和48 h后Q39使K562细胞的线粒体△ψm呈明显下降趋势,并且具有时间依赖关系.Western- blotting结果显示:Q39降低K562细胞的HIF-1α、procaspase-3和Bcl-2蛋白表达,明显增加Bax和cleaved caspase-3蛋白表达,并且促使PARP裂解.结论:Q39在缺氧条件下对K562细胞有较好的抑制作用,并能通过降低HIF-1α蛋白表达和调节其他凋亡相关蛋白表达,促使K562细胞线粒体△ψm下降,诱导细胞凋亡.Q39诱导细胞凋亡可能是通过线粒体和HIF-1α信号转导通路实现的.
목적:탐색3-(4-추분기)-2-(을풍기)-6-갑기규악람-1,4-이양화물(Q39)재결양조건하유도인백혈병K562세포조망적작용궤제.방법:①MTT법측정Q39대K562세포적체외억제작용,계산기반수억제농도(IC50).②4,6-Diamidino-2-Phenylindole(DAPI)형광염료염색관찰세포적조망정황.③류식세포술측정K562세포조망솔.④JC-1염색법관찰Q39대K562세포선립체막전위(△ψm)적영향.⑤Western-blotting법검측저양조건하세포내procaspase-3、cleaved caspase -3、PARP、Bax、Bcl-2화HIF-1α단백표체적변화.결과:재결양(3%O2)조건하,Q39대K562세포표현출교강적체외억제증식작용,IC50위(0.21±0.05)μmol/L.경DAPI염색증실,Q39작용6 h후개시유도K562세포조망,후기세포체적축소,병출현조망소체.류식세포술결과현시:K562세포여Q39공부육0、6、12화24 h적조망솔분별위2.8%、3.2%、5.9%화19.2%.JC-1염색실험결과현시:부육0、6、12、24화48 h후Q39사K562세포적선립체△ψm정명현하강추세,병차구유시간의뢰관계.Western- blotting결과현시:Q39강저K562세포적HIF-1α、procaspase-3화Bcl-2단백표체,명현증가Bax화cleaved caspase-3단백표체,병차촉사PARP렬해.결론:Q39재결양조건하대K562세포유교호적억제작용,병능통과강저HIF-1α단백표체화조절기타조망상관단백표체,촉사K562세포선립체△ψm하강,유도세포조망.Q39유도세포조망가능시통과선립체화HIF-1α신호전도통로실현적.