临床检验杂志
臨床檢驗雜誌
림상검험잡지
2007年
3期
182-184
,共3页
刘晓明%徐志学%糜克永%黄山%甄燕
劉曉明%徐誌學%糜剋永%黃山%甄燕
류효명%서지학%미극영%황산%견연
乙型肝炎病毒%基因1896位点突变%聚合酶链反应阻断试验
乙型肝炎病毒%基因1896位點突變%聚閤酶鏈反應阻斷試驗
을형간염병독%기인1896위점돌변%취합매련반응조단시험
目的 研究和评估PCR扩增阻断联合荧光探针检测乙型肝炎病毒(HBV)基因前C区1896位点突变的新方法.方法 根据HBV DNA前C区1896位点的突变设计一系列引物,引物3'末端位于1896位,并与突变模板1896位碱基互补.在引物的倒数第2及第3位碱基设计为错配碱基,以增加反应的特异性.结果 以2个错配碱基的突变型引物对野生型质粒进行PCR扩增,具有显著的阻断作用,对1896位突变型质粒无阻断作用,而且对其检测的最低拷贝数可达5×103拷贝/ml.选用该引物对95例随机采集的HBv阳性标本进行HBV前C区G1896A位碱基突变的检测,8例为阳性,其突变率为8.4%.结论 本法在临床标本检测中是一种有效的和简便的方法.
目的 研究和評估PCR擴增阻斷聯閤熒光探針檢測乙型肝炎病毒(HBV)基因前C區1896位點突變的新方法.方法 根據HBV DNA前C區1896位點的突變設計一繫列引物,引物3'末耑位于1896位,併與突變模闆1896位堿基互補.在引物的倒數第2及第3位堿基設計為錯配堿基,以增加反應的特異性.結果 以2箇錯配堿基的突變型引物對野生型質粒進行PCR擴增,具有顯著的阻斷作用,對1896位突變型質粒無阻斷作用,而且對其檢測的最低拷貝數可達5×103拷貝/ml.選用該引物對95例隨機採集的HBv暘性標本進行HBV前C區G1896A位堿基突變的檢測,8例為暘性,其突變率為8.4%.結論 本法在臨床標本檢測中是一種有效的和簡便的方法.
목적 연구화평고PCR확증조단연합형광탐침검측을형간염병독(HBV)기인전C구1896위점돌변적신방법.방법 근거HBV DNA전C구1896위점적돌변설계일계렬인물,인물3'말단위우1896위,병여돌변모판1896위감기호보.재인물적도수제2급제3위감기설계위착배감기,이증가반응적특이성.결과 이2개착배감기적돌변형인물대야생형질립진행PCR확증,구유현저적조단작용,대1896위돌변형질립무조단작용,이차대기검측적최저고패수가체5×103고패/ml.선용해인물대95례수궤채집적HBv양성표본진행HBV전C구G1896A위감기돌변적검측,8례위양성,기돌변솔위8.4%.결론 본법재림상표본검측중시일충유효적화간편적방법.
