中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
4期
380-383
,共4页
食品%李斯特菌%快速PCR
食品%李斯特菌%快速PCR
식품%리사특균%쾌속PCR
目的 利用荧光定量PCR技术,建立食品中单核细胞增生李斯特菌污染的快速敏感特异的检测方法.方法 以单核细胞增生李斯特菌的-hlyA基因作为靶序列,设计一对引物和探针,以单核细胞增生李斯特菌菌株,提取核酸DNA作为模板,优化引物和探针的浓度比和退火温度,以单核细胞增生李斯特菌和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性.并初步应用于样品的检测.结果 本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为0.8μmol/L,0.6μmol/L,退火温度为60℃时,具有良好的特异性和敏感性.在10株相关菌株的检测中,除单核细胞增生李斯特菌出现很好的阳性外,其余菌株均为阴性.在纯菌条件下,定量检测低限19cfu/ml.稳定性分析表明:同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均小于5%.检测样品结果显示Real-time PCR方法较传统方法敏感、快捷、简便.结论 该方法特异性强,稳定性高,操作简便快捷,适应食品微生物检验发展需要,具有较大的推广及应用价值.
目的 利用熒光定量PCR技術,建立食品中單覈細胞增生李斯特菌汙染的快速敏感特異的檢測方法.方法 以單覈細胞增生李斯特菌的-hlyA基因作為靶序列,設計一對引物和探針,以單覈細胞增生李斯特菌菌株,提取覈痠DNA作為模闆,優化引物和探針的濃度比和退火溫度,以單覈細胞增生李斯特菌和10種相關細菌攷覈檢測體繫的靈敏性、穩定性和特異性.併初步應用于樣品的檢測.結果 本研究建立的反應體繫在引物和探針的濃度為0.8μmol/L,0.6μmol/L,退火溫度為60℃時,具有良好的特異性和敏感性.在10株相關菌株的檢測中,除單覈細胞增生李斯特菌齣現很好的暘性外,其餘菌株均為陰性.在純菌條件下,定量檢測低限19cfu/ml.穩定性分析錶明:同一樣品重複檢測3次Ct值的變異繫數均小于5%.檢測樣品結果顯示Real-time PCR方法較傳統方法敏感、快捷、簡便.結論 該方法特異性彊,穩定性高,操作簡便快捷,適應食品微生物檢驗髮展需要,具有較大的推廣及應用價值.
목적 이용형광정량PCR기술,건립식품중단핵세포증생리사특균오염적쾌속민감특이적검측방법.방법 이단핵세포증생리사특균적-hlyA기인작위파서렬,설계일대인물화탐침,이단핵세포증생리사특균균주,제취핵산DNA작위모판,우화인물화탐침적농도비화퇴화온도,이단핵세포증생리사특균화10충상관세균고핵검측체계적령민성、은정성화특이성.병초보응용우양품적검측.결과 본연구건립적반응체계재인물화탐침적농도위0.8μmol/L,0.6μmol/L,퇴화온도위60℃시,구유량호적특이성화민감성.재10주상관균주적검측중,제단핵세포증생리사특균출현흔호적양성외,기여균주균위음성.재순균조건하,정량검측저한19cfu/ml.은정성분석표명:동일양품중복검측3차Ct치적변이계수균소우5%.검측양품결과현시Real-time PCR방법교전통방법민감、쾌첩、간편.결론 해방법특이성강,은정성고,조작간편쾌첩,괄응식품미생물검험발전수요,구유교대적추엄급응용개치.
