大肠杆菌O157:H7新蛋白Ecs4563的基因克隆、表达及纯化
대장간균O157:H7신단백Ecs4563적기인극륭、표체급순화
Cloning, expression and purification of E.coli O157:H7 novel protein Ecs4563
  • 万方数据
    军事医学科学院院刊 군사의학과학원원간
    BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
    2008年 1期 1-4 ,共4页

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    大肠杆菌O157:H7%ecs4563基因%克隆%基因表达%Ⅲ型分泌系统 大腸桿菌O157:H7%ecs4563基因%剋隆%基因錶達%Ⅲ型分泌繫統
    대장간균O157:H7%ecs4563기인%극륭%기인표체%Ⅲ형분비계통
    目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7新预测分子伴侣蛋白Ecs4563,以进一步开展其结构与功能的研究.方法:利用PCR方法从EHEC O157:H7基因组中扩增出分子伴侣基因ecs4563,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现诱导表达,采用Western印迹法进行鉴定,通过Ni2+螯合柱纯化获得目的蛋白.结果:构建了pET-24a-ecs4563重组质粒,实现了目的蛋白的融合表达,Ni2+金属螯合法纯化了目的蛋白,通过Western印迹法验证了融合蛋白的特异性.结论:得到了新预测分子伴侣Ecs4563,为下一步研究蛋白功能,进一步研究EHEC O157:H7的致病机制奠定了基础.
    목적:극륭、표체병순화장출혈성대장간균(EHEC)O157:H7신예측분자반려단백Ecs4563,이진일보개전기결구여공능적연구.방법:이용PCR방법종EHEC O157:H7기인조중확증출분자반려기인ecs4563,구건중조표체질립,재대장간균BL21(DE3)중실현유도표체,채용Western인적법진행감정,통과Ni2+오합주순화획득목적단백.결과:구건료pET-24a-ecs4563중조질립,실현료목적단백적융합표체,Ni2+금속오합법순화료목적단백,통과Western인적법험증료융합단백적특이성.결론:득도료신예측분자반려Ecs4563,위하일보연구단백공능,진일보연구EHEC O157:H7적치병궤제전정료기출.
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