重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2008年
4期
399-402
,共4页
黄环%吴永忠%李少林%郭启帅%林远洪%彭志平
黃環%吳永忠%李少林%郭啟帥%林遠洪%彭誌平
황배%오영충%리소림%곽계수%림원홍%팽지평
EGFR家族%RNA干扰%真核细胞表达载体
EGFR傢族%RNA榦擾%真覈細胞錶達載體
EGFR가족%RNA간우%진핵세포표체재체
目的:构建针对表皮生长因子受体(Epidermal growth factor recepter,EGFR)家族的小分子发夹状RNA(Small hairpinRNA,shRNA)干扰质粒表达载体,为本课题下一步研究提供有力_T具.方法:选择放疗不敏感的卵巢癌细胞SKOV3中高表达的EGFR家族同源性基因为靶基因,根据shRNA的设计原则,设计实验组及对照组shRNA.体外合成2段编码短发夹RNA序列的DNA单链,退火,克隆到相应载体pGensil-1的polⅢ启动子下游.结果:经酶切和DNA测序鉴定成功构建了EGFR家族同源性基因的RNA干扰表达载体,分别命名为pGensil-1-E及pGensil-1-C.为下一步体外、体内实验奠定了基础.
目的:構建針對錶皮生長因子受體(Epidermal growth factor recepter,EGFR)傢族的小分子髮夾狀RNA(Small hairpinRNA,shRNA)榦擾質粒錶達載體,為本課題下一步研究提供有力_T具.方法:選擇放療不敏感的卵巢癌細胞SKOV3中高錶達的EGFR傢族同源性基因為靶基因,根據shRNA的設計原則,設計實驗組及對照組shRNA.體外閤成2段編碼短髮夾RNA序列的DNA單鏈,退火,剋隆到相應載體pGensil-1的polⅢ啟動子下遊.結果:經酶切和DNA測序鑒定成功構建瞭EGFR傢族同源性基因的RNA榦擾錶達載體,分彆命名為pGensil-1-E及pGensil-1-C.為下一步體外、體內實驗奠定瞭基礎.
목적:구건침대표피생장인자수체(Epidermal growth factor recepter,EGFR)가족적소분자발협상RNA(Small hairpinRNA,shRNA)간우질립표체재체,위본과제하일보연구제공유력_T구.방법:선택방료불민감적란소암세포SKOV3중고표체적EGFR가족동원성기인위파기인,근거shRNA적설계원칙,설계실험조급대조조shRNA.체외합성2단편마단발협RNA서렬적DNA단련,퇴화,극륭도상응재체pGensil-1적polⅢ계동자하유.결과:경매절화DNA측서감정성공구건료EGFR가족동원성기인적RNA간우표체재체,분별명명위pGensil-1-E급pGensil-1-C.위하일보체외、체내실험전정료기출.
