中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2003年
1期
33-35,4
,共4页
马巴贝西虫%EMA-1基因%序列%表达
馬巴貝西蟲%EMA-1基因%序列%錶達
마파패서충%EMA-1기인%서렬%표체
通过聚合酶链式反应扩增出体外培养的马巴西虫USDA株基因EMA-1,将该片段连接到克隆质粒载体pUC19的Bam HI酶切位点上,并对其序列进行测定.结果表明该基因长度为836bp,编码的表面蛋白由272个氨基酸残基组成,与佛罗里达(Florida)株的EMA-1的氨基酸序列有95%左右的同源性.再将EMA-1基因片段插入到表达质粒载体pGE-MEX-2的BamHI位点上,并导入大肠杆菌JM109(DE3)中.经SDSPAGE分析和Western blot检测的结果表明,马巴贝西虫USDA株基因EMA-1,在大肠杆菌内获得表达,融合蛋白的分子量为65kDa.将其免疫给小鼠可产生特异性的抗马巴贝西虫抗体,且同驽巴贝西虫无交叉反应.
通過聚閤酶鏈式反應擴增齣體外培養的馬巴西蟲USDA株基因EMA-1,將該片段連接到剋隆質粒載體pUC19的Bam HI酶切位點上,併對其序列進行測定.結果錶明該基因長度為836bp,編碼的錶麵蛋白由272箇氨基痠殘基組成,與彿囉裏達(Florida)株的EMA-1的氨基痠序列有95%左右的同源性.再將EMA-1基因片段插入到錶達質粒載體pGE-MEX-2的BamHI位點上,併導入大腸桿菌JM109(DE3)中.經SDSPAGE分析和Western blot檢測的結果錶明,馬巴貝西蟲USDA株基因EMA-1,在大腸桿菌內穫得錶達,融閤蛋白的分子量為65kDa.將其免疫給小鼠可產生特異性的抗馬巴貝西蟲抗體,且同駑巴貝西蟲無交扠反應.
통과취합매련식반응확증출체외배양적마파서충USDA주기인EMA-1,장해편단련접도극륭질립재체pUC19적Bam HI매절위점상,병대기서렬진행측정.결과표명해기인장도위836bp,편마적표면단백유272개안기산잔기조성,여불라리체(Florida)주적EMA-1적안기산서렬유95%좌우적동원성.재장EMA-1기인편단삽입도표체질립재체pGE-MEX-2적BamHI위점상,병도입대장간균JM109(DE3)중.경SDSPAGE분석화Western blot검측적결과표명,마파패서충USDA주기인EMA-1,재대장간균내획득표체,융합단백적분자량위65kDa.장기면역급소서가산생특이성적항마파패서충항체,차동노파패서충무교차반응.
