南开大学学报（自然科学版）
南開大學學報（自然科學版）
남개대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)
2000年
3期
126-128
,共3页
戴立新%刘华%李国亮%尚克进%凌启阆
戴立新%劉華%李國亮%尚剋進%凌啟閬
대립신%류화%리국량%상극진%릉계랑
胶体金%钙调素结合蛋白%表达文库
膠體金%鈣調素結閤蛋白%錶達文庫
효체금%개조소결합단백%표체문고
以胶体金标记钙调素作为探针再辅以银染法(金标银染技术), 自玉米cDNA表达文库中筛选钙调素结合蛋白.该探针保持钙调素的活性,特异性地与钙调素结合蛋白相结合,在胶体金标记的基础上进行银染,灵敏度获得显著提高(达ng级).应用这一方法对玉米cDNA表达文库进行筛选获得了一个与探针特异结合的阳性克隆.以生物素标记的钙调素对该克隆表达的融合蛋白进行结合实验,结果表明该克隆编码的蛋白为一个钙调素结合蛋白.本文首次报道了以金标银染技术运用于表达文库的筛选并得到阳性克隆,这一方法的建立为cDNA表达文库的筛选提供了简便、快速的方法.
以膠體金標記鈣調素作為探針再輔以銀染法(金標銀染技術), 自玉米cDNA錶達文庫中篩選鈣調素結閤蛋白.該探針保持鈣調素的活性,特異性地與鈣調素結閤蛋白相結閤,在膠體金標記的基礎上進行銀染,靈敏度穫得顯著提高(達ng級).應用這一方法對玉米cDNA錶達文庫進行篩選穫得瞭一箇與探針特異結閤的暘性剋隆.以生物素標記的鈣調素對該剋隆錶達的融閤蛋白進行結閤實驗,結果錶明該剋隆編碼的蛋白為一箇鈣調素結閤蛋白.本文首次報道瞭以金標銀染技術運用于錶達文庫的篩選併得到暘性剋隆,這一方法的建立為cDNA錶達文庫的篩選提供瞭簡便、快速的方法.
이효체금표기개조소작위탐침재보이은염법(금표은염기술), 자옥미cDNA표체문고중사선개조소결합단백.해탐침보지개조소적활성,특이성지여개조소결합단백상결합,재효체금표기적기출상진행은염,령민도획득현저제고(체ng급).응용저일방법대옥미cDNA표체문고진행사선획득료일개여탐침특이결합적양성극륭.이생물소표기적개조소대해극륭표체적융합단백진행결합실험,결과표명해극륭편마적단백위일개개조소결합단백.본문수차보도료이금표은염기술운용우표체문고적사선병득도양성극륭,저일방법적건립위cDNA표체문고적사선제공료간편、쾌속적방법.
