细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2006年
6期
723-725
,共3页
鲁雄兵%谢辉莉%黄红卫%史子敏%熊建华%潘正跃
魯雄兵%謝輝莉%黃紅衛%史子敏%熊建華%潘正躍
로웅병%사휘리%황홍위%사자민%웅건화%반정약
树突状细胞%淋巴细胞趋化因子%单核细胞
樹突狀細胞%淋巴細胞趨化因子%單覈細胞
수돌상세포%림파세포추화인자%단핵세포
目的: 体外诱导、培养单核细胞源性树突状细胞(DC), 研究其淋巴细胞趋化因子(lymphotactin, Lptn)mRNA表达的动态变化.方法: 采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞(PBMC), 用重组人粒细胞-巨噬细胞集落群体刺激因子(rhGM- CSF)、重组人白细胞介素- 4 (rhIL- 4)刺激贴壁的单核细胞, 诱导培养DC, 第6天用重组人肿瘤坏死因子- α(rhTNF- α)诱导DC成熟.用流式细胞术检测成熟和未成熟的DC表面分子CD1a和CD83; 在电镜下观察成熟DC的形态; 以RT-PCR法扩增其Lptn cDNA并克隆至pGM-T Easy T载体中, 测序; 以RT-PCR结合凝胶成像分析系统, 半定量分析培养3、 5及7 d DC的Lptn mRNA表达的强度.结果: 电镜观察培养7 d的细胞具有典型的DC形态, 流式细胞术检测DC表面分子CD83呈高水平表达.用RT-PCR法克隆的cDNA序列与GenBank中U23772(登陆号)提供的序列一致.培养3 d的DC不表达Lptn mRNA, 培养7 d的DC较培养5 d的DC Lptn mRNA表达增强.结论: 单核细胞源性DC能表达Lptn mRNA, 随着DC的成熟, Lptn mRNA的表达增强.
目的: 體外誘導、培養單覈細胞源性樹突狀細胞(DC), 研究其淋巴細胞趨化因子(lymphotactin, Lptn)mRNA錶達的動態變化.方法: 採用密度梯度離心的方法分離人外週血中的單箇覈細胞(PBMC), 用重組人粒細胞-巨噬細胞集落群體刺激因子(rhGM- CSF)、重組人白細胞介素- 4 (rhIL- 4)刺激貼壁的單覈細胞, 誘導培養DC, 第6天用重組人腫瘤壞死因子- α(rhTNF- α)誘導DC成熟.用流式細胞術檢測成熟和未成熟的DC錶麵分子CD1a和CD83; 在電鏡下觀察成熟DC的形態; 以RT-PCR法擴增其Lptn cDNA併剋隆至pGM-T Easy T載體中, 測序; 以RT-PCR結閤凝膠成像分析繫統, 半定量分析培養3、 5及7 d DC的Lptn mRNA錶達的彊度.結果: 電鏡觀察培養7 d的細胞具有典型的DC形態, 流式細胞術檢測DC錶麵分子CD83呈高水平錶達.用RT-PCR法剋隆的cDNA序列與GenBank中U23772(登陸號)提供的序列一緻.培養3 d的DC不錶達Lptn mRNA, 培養7 d的DC較培養5 d的DC Lptn mRNA錶達增彊.結論: 單覈細胞源性DC能錶達Lptn mRNA, 隨著DC的成熟, Lptn mRNA的錶達增彊.
목적: 체외유도、배양단핵세포원성수돌상세포(DC), 연구기림파세포추화인자(lymphotactin, Lptn)mRNA표체적동태변화.방법: 채용밀도제도리심적방법분리인외주혈중적단개핵세포(PBMC), 용중조인립세포-거서세포집락군체자격인자(rhGM- CSF)、중조인백세포개소- 4 (rhIL- 4)자격첩벽적단핵세포, 유도배양DC, 제6천용중조인종류배사인자- α(rhTNF- α)유도DC성숙.용류식세포술검측성숙화미성숙적DC표면분자CD1a화CD83; 재전경하관찰성숙DC적형태; 이RT-PCR법확증기Lptn cDNA병극륭지pGM-T Easy T재체중, 측서; 이RT-PCR결합응효성상분석계통, 반정량분석배양3、 5급7 d DC적Lptn mRNA표체적강도.결과: 전경관찰배양7 d적세포구유전형적DC형태, 류식세포술검측DC표면분자CD83정고수평표체.용RT-PCR법극륭적cDNA서렬여GenBank중U23772(등륙호)제공적서렬일치.배양3 d적DC불표체Lptn mRNA, 배양7 d적DC교배양5 d적DC Lptn mRNA표체증강.결론: 단핵세포원성DC능표체Lptn mRNA, 수착DC적성숙, Lptn mRNA적표체증강.
