菌物学报
菌物學報
균물학보
MYCOSYSTEMA
2008年
3期
377-384
,共8页
金凯%张永军%罗志兵%林健文%裴炎
金凱%張永軍%囉誌兵%林健文%裴炎
금개%장영군%라지병%림건문%배염
昆虫病原真菌%转化%冰冻切片%荧光检测
昆蟲病原真菌%轉化%冰凍切片%熒光檢測
곤충병원진균%전화%빙동절편%형광검측
绿色荧光蛋白(GFP)作为一种重要的报告基因,在病原菌和寄主之间的互作研究中具有良好的应用前景.利用草丁膦抗性基因bar为筛选标记,构建了组成性表达绿色荧光蛋白基因egfp的载体pBG,并转入球孢白僵菌获得成功表达.将转化子接种菜青虫进行生物测定表明,组成性表达egfp不影响球孢白僵菌的毒力.进一步利用冰冻切片和荧光显微观察技术监测球孢白僵菌侵染寄主行为,结果显示,通过荧光观察可清楚的检测到病原菌在昆虫体表的附着、菌丝穿透体壁以及菌丝从寄主体内长出等侵染过程.由此表明,GFP可有效用于球孢白僵菌的遗传标记,进行病原菌的鉴别、侵染致病机理及相关功能基因的表达模式研究.
綠色熒光蛋白(GFP)作為一種重要的報告基因,在病原菌和寄主之間的互作研究中具有良好的應用前景.利用草丁膦抗性基因bar為篩選標記,構建瞭組成性錶達綠色熒光蛋白基因egfp的載體pBG,併轉入毬孢白僵菌穫得成功錶達.將轉化子接種菜青蟲進行生物測定錶明,組成性錶達egfp不影響毬孢白僵菌的毒力.進一步利用冰凍切片和熒光顯微觀察技術鑑測毬孢白僵菌侵染寄主行為,結果顯示,通過熒光觀察可清楚的檢測到病原菌在昆蟲體錶的附著、菌絲穿透體壁以及菌絲從寄主體內長齣等侵染過程.由此錶明,GFP可有效用于毬孢白僵菌的遺傳標記,進行病原菌的鑒彆、侵染緻病機理及相關功能基因的錶達模式研究.
록색형광단백(GFP)작위일충중요적보고기인,재병원균화기주지간적호작연구중구유량호적응용전경.이용초정련항성기인bar위사선표기,구건료조성성표체록색형광단백기인egfp적재체pBG,병전입구포백강균획득성공표체.장전화자접충채청충진행생물측정표명,조성성표체egfp불영향구포백강균적독력.진일보이용빙동절편화형광현미관찰기술감측구포백강균침염기주행위,결과현시,통과형광관찰가청초적검측도병원균재곤충체표적부착、균사천투체벽이급균사종기주체내장출등침염과정.유차표명,GFP가유효용우구포백강균적유전표기,진행병원균적감별、침염치병궤리급상관공능기인적표체모식연구.
