口蹄疫病毒2C'3AB基因重组杆状病毒的构建及其表达
구제역병독2C'3AB기인중조간상병독적구건급기표체
Construction and expression of recombinant baculovirus with 2C'3AB gene of foot-and-mouth disease virus
  • 万方数据
    中国兽医科学 중국수의과학
    VETERINARY SCIENCE IN CHINA
    2008年 6期 483-488 ,共6页

    张小丽%卢曾军%田美娜%孙普%曹轶梅%付元芳%马小军%刘在新%谢庆阁

    장소려%로증군%전미나%손보%조질매%부원방%마소군%류재신%사경각

    口蹄疫病毒%2C 3AB基因%重组杆状病毒%表达 口蹄疫病毒%2C 3AB基因%重組桿狀病毒%錶達
    구제역병독%2C 3AB기인%중조간상병독%표체
    将含有口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白2C部分基因编码区及3AB完整基因编码区的基因片段2C'3AB重组于杆状病毒穿梭质粒pMelBac-B,经PCR、酶切及序列分析鉴定正确后,命名为pMel-2C'3AB.将重组穿梭质粒pMel-2C'3AB与杆状病毒骨架共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选及PCR鉴定,构建了含有目的基因的重组杆状病毒.用该病毒感染High Five细胞,细胞裂解液的SDS-PAGE电泳结果显示,出现一约为43ku的蛋白带,与预期大小一致;Western-blotting结果表明,该表达产物能被FMDV阳性血清及2C'3AB单克隆抗体识别;间接ELISA结果显示,表达的目的蛋白能与牛、羊、猪的O型FMDV阳性血清发生特异性反应.证实,FMDV 2C'3AB基因在昆虫细胞中得到了表达,且表达产物具有良好的反应活性.
    장함유구제역병독(FMDV)비결구단백2C부분기인편마구급3AB완정기인편마구적기인편단2C'3AB중조우간상병독천사질립pMelBac-B,경PCR、매절급서렬분석감정정학후,명명위pMel-2C'3AB.장중조천사질립pMel-2C'3AB여간상병독골가공전염Sf9곤충세포,통과서반사선급PCR감정,구건료함유목적기인적중조간상병독.용해병독감염High Five세포,세포렬해액적SDS-PAGE전영결과현시,출현일약위43ku적단백대,여예기대소일치;Western-blotting결과표명,해표체산물능피FMDV양성혈청급2C'3AB단극륭항체식별;간접ELISA결과현시,표체적목적단백능여우、양、저적O형FMDV양성혈청발생특이성반응.증실,FMDV 2C'3AB기인재곤충세포중득도료표체,차표체산물구유량호적반응활성.
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