广东畜牧兽医科技
廣東畜牧獸醫科技
엄동축목수의과기
GUANDONG JOURNAL OF ANIMAL AND VETERINARY SCIENCE
2009年
6期
30-34
,共5页
许如苏%陈茹%林彩华%杨梓坚%陈冠武
許如囌%陳茹%林綵華%楊梓堅%陳冠武
허여소%진여%림채화%양재견%진관무
沙门氏菌%LUXTMPCR%TaqMan%PCR%食品
沙門氏菌%LUXTMPCR%TaqMan%PCR%食品
사문씨균%LUXTMPCR%TaqMan%PCR%식품
本研究针对沙门氏菌invA基因的保守序列,设计特异的LUXTM荧光标记引物,通过优化反应条件和参数,建立可快速检测沙门氏菌的LUXTM荧光PCR检测方法.结果显示,该方法高度敏感,其对纯菌的检测低限达到102cfu/mL,经6 h增菌培养后检测,对样品液的检测低限达到1 cfu/mL;特异性强,测试的全部1 3株沙门氏菌标准和参考菌株均呈阳性反应,测试的全部27株非目标菌均呈阴性反应;重复性好,定量检测批内和批间的变异系数均小于2%.应用本方法检测食品样品240份,结果检出阳性4份,与TaqMan荧光PCR和SN标准检测结果完全一致.本方法可在8 h内完成对样品中沙门氏菌的检测,其检测的快速性、敏感性和特异性与TaqMan荧光PCR技术相当,且检测成本较低.
本研究針對沙門氏菌invA基因的保守序列,設計特異的LUXTM熒光標記引物,通過優化反應條件和參數,建立可快速檢測沙門氏菌的LUXTM熒光PCR檢測方法.結果顯示,該方法高度敏感,其對純菌的檢測低限達到102cfu/mL,經6 h增菌培養後檢測,對樣品液的檢測低限達到1 cfu/mL;特異性彊,測試的全部1 3株沙門氏菌標準和參攷菌株均呈暘性反應,測試的全部27株非目標菌均呈陰性反應;重複性好,定量檢測批內和批間的變異繫數均小于2%.應用本方法檢測食品樣品240份,結果檢齣暘性4份,與TaqMan熒光PCR和SN標準檢測結果完全一緻.本方法可在8 h內完成對樣品中沙門氏菌的檢測,其檢測的快速性、敏感性和特異性與TaqMan熒光PCR技術相噹,且檢測成本較低.
본연구침대사문씨균invA기인적보수서렬,설계특이적LUXTM형광표기인물,통과우화반응조건화삼수,건립가쾌속검측사문씨균적LUXTM형광PCR검측방법.결과현시,해방법고도민감,기대순균적검측저한체도102cfu/mL,경6 h증균배양후검측,대양품액적검측저한체도1 cfu/mL;특이성강,측시적전부1 3주사문씨균표준화삼고균주균정양성반응,측시적전부27주비목표균균정음성반응;중복성호,정량검측비내화비간적변이계수균소우2%.응용본방법검측식품양품240빈,결과검출양성4빈,여TaqMan형광PCR화SN표준검측결과완전일치.본방법가재8 h내완성대양품중사문씨균적검측,기검측적쾌속성、민감성화특이성여TaqMan형광PCR기술상당,차검측성본교저.