中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2006年
8期
752-755
,共4页
罗保君%石英%常国辉%张秀娟%周育森
囉保君%石英%常國輝%張秀娟%週育森
라보군%석영%상국휘%장수연%주육삼
构建及筛选%汉滩病毒M片段%噬菌体文库
構建及篩選%漢灘病毒M片段%噬菌體文庫
구건급사선%한탄병독M편단%서균체문고
目的 通过构建汉滩病毒M片段的噬菌体展示文库,筛选汉滩病毒包膜蛋白的抗原表位.方法 DNase Ⅰ随机消化的M片段与载体pComb3连接,转化宿主XL-1Blue,在辅助噬菌体VCSM13存在的条件下,获得M片段的随机噬菌体文库.利用纯化的恢复期病人血清对M片段噬菌体文库进行3轮淘洗,通过ELISA、序列分析对所获得的克隆进行鉴定.并对其中2个阳性克隆的目的 片段进行了原核表达和免疫原性分析.结果 筛选获得的5个阳性噬菌体克隆均位于G1蛋白编码区,原核表达的2个阳性克隆片段蛋白免疫兔,免疫兔血清能与病毒抗原发生特异反应.结论 本技术路线可用于汉滩病毒包膜蛋白抗原表位的研究,为汉滩病毒诊断试剂的研制、亚单位疫苗的设计提供了数据.
目的 通過構建漢灘病毒M片段的噬菌體展示文庫,篩選漢灘病毒包膜蛋白的抗原錶位.方法 DNase Ⅰ隨機消化的M片段與載體pComb3連接,轉化宿主XL-1Blue,在輔助噬菌體VCSM13存在的條件下,穫得M片段的隨機噬菌體文庫.利用純化的恢複期病人血清對M片段噬菌體文庫進行3輪淘洗,通過ELISA、序列分析對所穫得的剋隆進行鑒定.併對其中2箇暘性剋隆的目的 片段進行瞭原覈錶達和免疫原性分析.結果 篩選穫得的5箇暘性噬菌體剋隆均位于G1蛋白編碼區,原覈錶達的2箇暘性剋隆片段蛋白免疫兔,免疫兔血清能與病毒抗原髮生特異反應.結論 本技術路線可用于漢灘病毒包膜蛋白抗原錶位的研究,為漢灘病毒診斷試劑的研製、亞單位疫苗的設計提供瞭數據.
목적 통과구건한탄병독M편단적서균체전시문고,사선한탄병독포막단백적항원표위.방법 DNase Ⅰ수궤소화적M편단여재체pComb3련접,전화숙주XL-1Blue,재보조서균체VCSM13존재적조건하,획득M편단적수궤서균체문고.이용순화적회복기병인혈청대M편단서균체문고진행3륜도세,통과ELISA、서렬분석대소획득적극륭진행감정.병대기중2개양성극륭적목적 편단진행료원핵표체화면역원성분석.결과 사선획득적5개양성서균체극륭균위우G1단백편마구,원핵표체적2개양성극륭편단단백면역토,면역토혈청능여병독항원발생특이반응.결론 본기술로선가용우한탄병독포막단백항원표위적연구,위한탄병독진단시제적연제、아단위역묘적설계제공료수거.
