CAJ | 학술논문

目的:探讨两种浓度胎牛血清培养的不同传代次数的骨髓间充质干细胞在生长特性及表面标志方面的差异性.方法:实验于2004年在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心进行.取健康Wistar大鼠5只,采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓间充质干细胞,然后分别以体积分数为0.1和0.15的胎牛血清的L-DMEM培养基进行贴壁培养,观察原代和传代细胞的形态特征、生长曲线及表面标志CD45,CD11b,CD29和CD44的表达(骨髓间充质干细胞表达CD29和CD44,造血前体细胞表达CD45和CD11b).结果:①两种浓度胎牛血清培养细胞均能获得贴壁梭形骨髓间充质干细胞,但体积分数为0.15的胎牛血清原代培养的细胞分裂增殖较快,集落融合较早,传代时间较短(平均10 d).②体积分数为0.1的胎牛血清传代培养第1,2代细胞均质性相对较差,CD45阳性率分别为23.4%,15.4%,CD11b阳性率分别为16.6%,10.3%,高于体积分数为0.15的胎牛血清培养组(P＜0.05),至第3代后两组已无差异,CD45和CD11b阳性率均小于5%,而CD29和CD44阳性率均大于95%.③两组的骨髓间充质干细胞生长曲线相似,但体积分数为0.15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞对数生长期峰值出现较早,为第6天,而体积分数为0.1的胎牛血清培养组为第7天.结论:体积分数为0.1和0.15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞在生长特性和表面标志方面存在差异.使用体积分数为0.1的胎牛血清已可满足骨髓间充质干细胞的分离纯化和培养扩增,但要在短期内获得较纯的骨髓间充质干细胞,使用体积分数为0.15胎牛血清优于体积分数为0.1胎牛血清.
목적:탐토량충농도태우혈청배양적불동전대차수적골수간충질간세포재생장특성급표면표지방면적차이성.방법:실험우2004년재중산대학부속제이의원림백흔의학연구중심진행.취건강Wistar대서5지,채용밀도제도리심법분리대서골수간충질간세포,연후분별이체적분수위0.1화0.15적태우혈청적L-DMEM배양기진행첩벽배양,관찰원대화전대세포적형태특정、생장곡선급표면표지CD45,CD11b,CD29화CD44적표체(골수간충질간세포표체CD29화CD44,조혈전체세포표체CD45화CD11b).결과:①량충농도태우혈청배양세포균능획득첩벽사형골수간충질간세포,단체적분수위0.15적태우혈청원대배양적세포분렬증식교쾌,집락융합교조,전대시간교단(평균10 d).②체적분수위0.1적태우혈청전대배양제1,2대세포균질성상대교차,CD45양성솔분별위23.4%,15.4%,CD11b양성솔분별위16.6%,10.3%,고우체적분수위0.15적태우혈청배양조(P＜0.05),지제3대후량조이무차이,CD45화CD11b양성솔균소우5%,이CD29화CD44양성솔균대우95%.③량조적골수간충질간세포생장곡선상사,단체적분수위0.15적태우혈청배양적골수간충질간세포대수생장기봉치출현교조,위제6천,이체적분수위0.1적태우혈청배양조위제7천.결론:체적분수위0.1화0.15적태우혈청배양적골수간충질간세포재생장특성화표면표지방면존재차이.사용체적분수위0.1적태우혈청이가만족골수간충질간세포적분리순화화배양확증,단요재단기내획득교순적골수간충질간세포,사용체적분수위0.15태우혈청우우체적분수위0.1태우혈청.