CAJ | 학술논문

目的:探讨ROCK-I蛋白表达或活性改变对人卵巢癌细胞运动表型的影响.方法:将ROCK-I的反义寡核苷酸(ASODN)或其显性激活突变体p160Δ3用脂质体介导,转染人卵巢癌细胞系CAOV-3细胞,用RT-PCR与Western blot印迹法检测转染前后ROCK-I和p160Δ3 mRNA和蛋白的表达;rhodamine-phalloidin染色显示ROCK-I ASODN和p160Δ3对细胞骨架的影响;Transwell小室和划痕实验观察ROCK-I表达降低及其活性提高后卵巢癌细胞系CAOV-3运动能力的改变.结果:转染ROCK-I ASODN后,CAOV-3细胞内ROCK-I蛋白的表达明显减少,最大抑制率可达49%;转染的p160Δ3在细胞内获得有效表达.转染ROCK-I ASODN后CAOV-3细胞伪足消失,肌动蛋白纤维减少且变得无序,而转染p160Δ3后细胞伪足增多变长,肌动蛋白纤维亦明显增多,且沿细胞长轴分布.伤口愈合实验显示,ROCK-I ASODN明显抑制了CAOV-3细胞的迁移,p160Δ3则显著增强了其迁移能力;转染10μmol/L或20μmol/L ROCK-I ASODN后细胞的随机运动能力分别为其对照组的(72.0±1.3)%和(55.9±2.5)%,定向运动能力分别为其对照组的(72.5±3.4)%和(54.5±1.9)%;转染p160Δ3后,与对照组相比细胞的随机运动能力提高(38.7±1.2)%,定向运动能力提高(40.2±2.6)%.结论:ROCK-I蛋白表达或活性改变与人卵巢癌细胞CAOV-3的运动能力密切相关,ROCK-I可能成为治疗卵巢癌肿瘤细胞转移的新靶点.
목적:탐토ROCK-I단백표체혹활성개변대인란소암세포운동표형적영향.방법:장ROCK-I적반의과핵감산(ASODN)혹기현성격활돌변체p160Δ3용지질체개도,전염인란소암세포계CAOV-3세포,용RT-PCR여Western blot인적법검측전염전후ROCK-I화p160Δ3 mRNA화단백적표체;rhodamine-phalloidin염색현시ROCK-I ASODN화p160Δ3대세포골가적영향;Transwell소실화화흔실험관찰ROCK-I표체강저급기활성제고후란소암세포계CAOV-3운동능력적개변.결과:전염ROCK-I ASODN후,CAOV-3세포내ROCK-I단백적표체명현감소,최대억제솔가체49%;전염적p160Δ3재세포내획득유효표체.전염ROCK-I ASODN후CAOV-3세포위족소실,기동단백섬유감소차변득무서,이전염p160Δ3후세포위족증다변장,기동단백섬유역명현증다,차연세포장축분포.상구유합실험현시,ROCK-I ASODN명현억제료CAOV-3세포적천이,p160Δ3칙현저증강료기천이능력;전염10μmol/L혹20μmol/L ROCK-I ASODN후세포적수궤운동능력분별위기대조조적(72.0±1.3)%화(55.9±2.5)%,정향운동능력분별위기대조조적(72.5±3.4)%화(54.5±1.9)%;전염p160Δ3후,여대조조상비세포적수궤운동능력제고(38.7±1.2)%,정향운동능력제고(40.2±2.6)%.결론:ROCK-I단백표체혹활성개변여인란소암세포CAOV-3적운동능력밀절상관,ROCK-I가능성위치료란소암종류세포전이적신파점.