标记免疫分析与临床
標記免疫分析與臨床
표기면역분석여림상
LABELED IMMUNOASSAYS AND CLINICAL MEDICINE
2009年
1期
34-37
,共4页
焦伟伟%孙琳%李兆娜%顾艺%孙桂芝%申阿东
焦偉偉%孫琳%李兆娜%顧藝%孫桂芝%申阿東
초위위%손림%리조나%고예%손계지%신아동
结核分枝杆菌%抗药性%异烟肼%等位基因特异多重PCR%反向线形杂交%PCR-RFLP
結覈分枝桿菌%抗藥性%異煙肼%等位基因特異多重PCR%反嚮線形雜交%PCR-RFLP
결핵분지간균%항약성%이연정%등위기인특이다중PCR%반향선형잡교%PCR-RFLP
了解北京地区异烟肼(INH)耐药结核分枝杆菌(MTB)的分子特点,评价等位基因特异多重PCR在INH耐药性快速检测中的应用价值.选取102株北京地区MTB临床分离株,首先分别采用PCR-RFLP和反向线性杂交技术(RLB)检测耐药相关基因katG和inhA突变,然后运用等位基因特异多重PCR方法同时检测katG和inhA基因突变,并与PCR-RFLP和RLB分别检测的结果进行比较.采用等位基因特异多重PCR检测发现,INH耐药株中60.3%(35/58)存在katG315突变,13.8%(8/58)发生了inhA突变,两者同时突变率为6.9%(4/58),INH敏感株中没有发现katG315突变,而inhA突变率为18.2%(8/44).上述检测结果与PCR-RFLP和RLB分别检测的结果完全一致,且等于两种方法结果之和,提示等位基因特异多重PCR可完全取代PCR-RFLP和RLB. 北京地区INH耐药菌株以katG315 AGC→ACC突变为主;联合检测katG315和inhA基因可提高INH耐药株的检出率.等位基因特异多重PCR操作简便,结果易于判断,可作为临床MTB菌株中INH耐药性快速检测的辅助手段.
瞭解北京地區異煙肼(INH)耐藥結覈分枝桿菌(MTB)的分子特點,評價等位基因特異多重PCR在INH耐藥性快速檢測中的應用價值.選取102株北京地區MTB臨床分離株,首先分彆採用PCR-RFLP和反嚮線性雜交技術(RLB)檢測耐藥相關基因katG和inhA突變,然後運用等位基因特異多重PCR方法同時檢測katG和inhA基因突變,併與PCR-RFLP和RLB分彆檢測的結果進行比較.採用等位基因特異多重PCR檢測髮現,INH耐藥株中60.3%(35/58)存在katG315突變,13.8%(8/58)髮生瞭inhA突變,兩者同時突變率為6.9%(4/58),INH敏感株中沒有髮現katG315突變,而inhA突變率為18.2%(8/44).上述檢測結果與PCR-RFLP和RLB分彆檢測的結果完全一緻,且等于兩種方法結果之和,提示等位基因特異多重PCR可完全取代PCR-RFLP和RLB. 北京地區INH耐藥菌株以katG315 AGC→ACC突變為主;聯閤檢測katG315和inhA基因可提高INH耐藥株的檢齣率.等位基因特異多重PCR操作簡便,結果易于判斷,可作為臨床MTB菌株中INH耐藥性快速檢測的輔助手段.
료해북경지구이연정(INH)내약결핵분지간균(MTB)적분자특점,평개등위기인특이다중PCR재INH내약성쾌속검측중적응용개치.선취102주북경지구MTB림상분리주,수선분별채용PCR-RFLP화반향선성잡교기술(RLB)검측내약상관기인katG화inhA돌변,연후운용등위기인특이다중PCR방법동시검측katG화inhA기인돌변,병여PCR-RFLP화RLB분별검측적결과진행비교.채용등위기인특이다중PCR검측발현,INH내약주중60.3%(35/58)존재katG315돌변,13.8%(8/58)발생료inhA돌변,량자동시돌변솔위6.9%(4/58),INH민감주중몰유발현katG315돌변,이inhA돌변솔위18.2%(8/44).상술검측결과여PCR-RFLP화RLB분별검측적결과완전일치,차등우량충방법결과지화,제시등위기인특이다중PCR가완전취대PCR-RFLP화RLB. 북경지구INH내약균주이katG315 AGC→ACC돌변위주;연합검측katG315화inhA기인가제고INH내약주적검출솔.등위기인특이다중PCR조작간편,결과역우판단,가작위림상MTB균주중INH내약성쾌속검측적보조수단.
