广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
5期
703-705
,共3页
王压娣%温坤%丘立文%狄飚%袁国勇%车小燕
王壓娣%溫坤%丘立文%狄飚%袁國勇%車小燕
왕압제%온곤%구립문%적표%원국용%차소연
A型流感病毒%核农壳蛋白%单克隆抗体%酶联免疫吸附试验
A型流感病毒%覈農殼蛋白%單剋隆抗體%酶聯免疫吸附試驗
A형류감병독%핵농각단백%단극륭항체%매련면역흡부시험
目的 制备和鉴定A型流感病毒核衣壳蛋白单克隆抗体,建立A型流感病毒核衣壳蛋白ELISA捕获法,用于A型流感病毒感染的实验室早期诊断.方法 利用杆状病毒系统表达A型流感病毒核衣壳蛋白,免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,采用ELISA间接法、免疫荧光和免疫印迹进行筛选和鉴定,用双抗体夹心ELISA捕获法建立检测A型流感病毒核衣壳蛋白的方法 .结果 获得8株、共识别4个A型流感病毒核衣壳蛋白不同抗原位点的单克隆抗体,选择以单抗2B8A11作为捕获抗体,以C16A15作为检测抗体为最佳抗体对,建立双抗体夹心ELISA捕获法.检测流感患者的当日采集和冻存的呼吸道标本,与病毒分离培养方法 的符合率分别为100%和42.9%;与B型流感病毒和其他呼吸道病毒无交叉反应.检测流感患者当日采集的呼吸道标本敏感性高于德国Serion试剂盒(P<0.001),与RT-PCR方法 比较差异无显著性(P=0.5).结论 成功建立了灵敏度高、特异性强的A型流感病毒核衣壳蛋白抗原的ELISA捕获法,为A型流感病毒感染的实验室早期诊断提供技术方法 .
目的 製備和鑒定A型流感病毒覈衣殼蛋白單剋隆抗體,建立A型流感病毒覈衣殼蛋白ELISA捕穫法,用于A型流感病毒感染的實驗室早期診斷.方法 利用桿狀病毒繫統錶達A型流感病毒覈衣殼蛋白,免疫BALB/c小鼠製備單剋隆抗體,採用ELISA間接法、免疫熒光和免疫印跡進行篩選和鑒定,用雙抗體夾心ELISA捕穫法建立檢測A型流感病毒覈衣殼蛋白的方法 .結果 穫得8株、共識彆4箇A型流感病毒覈衣殼蛋白不同抗原位點的單剋隆抗體,選擇以單抗2B8A11作為捕穫抗體,以C16A15作為檢測抗體為最佳抗體對,建立雙抗體夾心ELISA捕穫法.檢測流感患者的噹日採集和凍存的呼吸道標本,與病毒分離培養方法 的符閤率分彆為100%和42.9%;與B型流感病毒和其他呼吸道病毒無交扠反應.檢測流感患者噹日採集的呼吸道標本敏感性高于德國Serion試劑盒(P<0.001),與RT-PCR方法 比較差異無顯著性(P=0.5).結論 成功建立瞭靈敏度高、特異性彊的A型流感病毒覈衣殼蛋白抗原的ELISA捕穫法,為A型流感病毒感染的實驗室早期診斷提供技術方法 .
목적 제비화감정A형류감병독핵의각단백단극륭항체,건립A형류감병독핵의각단백ELISA포획법,용우A형류감병독감염적실험실조기진단.방법 이용간상병독계통표체A형류감병독핵의각단백,면역BALB/c소서제비단극륭항체,채용ELISA간접법、면역형광화면역인적진행사선화감정,용쌍항체협심ELISA포획법건립검측A형류감병독핵의각단백적방법 .결과 획득8주、공식별4개A형류감병독핵의각단백불동항원위점적단극륭항체,선택이단항2B8A11작위포획항체,이C16A15작위검측항체위최가항체대,건립쌍항체협심ELISA포획법.검측류감환자적당일채집화동존적호흡도표본,여병독분리배양방법 적부합솔분별위100%화42.9%;여B형류감병독화기타호흡도병독무교차반응.검측류감환자당일채집적호흡도표본민감성고우덕국Serion시제합(P<0.001),여RT-PCR방법 비교차이무현저성(P=0.5).결론 성공건립료령민도고、특이성강적A형류감병독핵의각단백항원적ELISA포획법,위A형류감병독감염적실험실조기진단제공기술방법 .
