CAJ | 학술논문

利用前期构建的软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora subsp.carotovora)菌株BC1侵染诱导表达的大白莱(Brassica campestris subsp.pekinensis)SSH cDNA文库和cDNA芯片.在芯片分析的基础上,选取一个与拟南芥(Arabidopsis thaliana)类富含亮氨酸重复(LRR)抗病蛋白Cf-5高度同源的EST序列(GenBank登录号:DN962361)进行进一步分析.用5'-和3'-RACE方法克隆了该基因全长1 286 bp的cDNA序列,包含一个完整ORF和3'UTR,并具有Poly(A)加尾信号,将其命名为BcLRR基因(GenBank登录号:EU424347).BcLRR推导蛋白序列由327个氨基酸组成,除N端跨膜螺旋结构域外,大部分为LRR结构域,包含8个胞外LRR重复单元,由7个规范的LXXLXLXN结构和1个不规范LXXLXXXN组成.氨基酸序列比对分析发现,BeLRR蛋白与拟南芥类LRR抗病蛋白Cf-5同源性高达96.6%,与棉花(Gossypium hirsutum L.)类LRR抗病蛋白GhLRR同源性为82.3%,它们之间大部分变异限定在N端信号肽区.系统发育关系表明,在三种植物中功能均未知的这一蛋白属于一个新的胞外LRR蛋白类型,在结构上不同于其它抗性已知的胞外型LRR蛋白.将受CaMV 35S启动子驱动的BcLRR基因完整ORF序列转化拟南芥Col-0,PCR鉴定、Southern杂交和RT-PCR分析表明,BcLRR基因已整合到拟南芥基因组中,并在拟南芥中获得了转录.软腐病病情指数分析表明,转BcLRR植株提高了对软腐欧文氏菌的抗性.
이용전기구건적연부구문씨균(Erwinia carotovora subsp.carotovora)균주BC1침염유도표체적대백래(Brassica campestris subsp.pekinensis)SSH cDNA문고화cDNA심편.재심편분석적기출상,선취일개여의남개(Arabidopsis thaliana)류부함량안산중복(LRR)항병단백Cf-5고도동원적EST서렬(GenBank등록호:DN962361)진행진일보분석.용5'-화3'-RACE방법극륭료해기인전장1 286 bp적cDNA서렬,포함일개완정ORF화3'UTR,병구유Poly(A)가미신호,장기명명위BcLRR기인(GenBank등록호:EU424347).BcLRR추도단백서렬유327개안기산조성,제N단과막라선결구역외,대부분위LRR결구역,포함8개포외LRR중복단원,유7개규범적LXXLXLXN결구화1개불규범LXXLXXXN조성.안기산서렬비대분석발현,BeLRR단백여의남개류LRR항병단백Cf-5동원성고체96.6%,여면화(Gossypium hirsutum L.)류LRR항병단백GhLRR동원성위82.3%,타문지간대부분변이한정재N단신호태구.계통발육관계표명,재삼충식물중공능균미지적저일단백속우일개신적포외LRR단백류형,재결구상불동우기타항성이지적포외형LRR단백.장수CaMV 35S계동자구동적BcLRR기인완정ORF서렬전화의남개Col-0,PCR감정、Southern잡교화RT-PCR분석표명,BcLRR기인이정합도의남개기인조중,병재의남개중획득료전록.연부병병정지수분석표명,전BcLRR식주제고료대연부구문씨균적항성.