解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2010年
6期
796-804
,共9页
张俊士%贺维亚%鲁广秀%刘大建%牛艳丽%崔占军%邓锦波
張俊士%賀維亞%魯廣秀%劉大建%牛豔麗%崔佔軍%鄧錦波
장준사%하유아%로엄수%류대건%우염려%최점군%산금파
胎儿酒精综合征%普肯耶细胞%自噬%透射电子显微镜%免疫荧光%免疫印迹法%小鼠
胎兒酒精綜閤徵%普肯耶細胞%自噬%透射電子顯微鏡%免疫熒光%免疫印跡法%小鼠
태인주정종합정%보긍야세포%자서%투사전자현미경%면역형광%면역인적법%소서
目的 探讨孕期酒精暴露对仔鼠小脑普肯耶细胞自噬的影响.方法 从妊娠母鼠第5天酒精灌胃至仔鼠出生,建立孕期酒精暴露动物模型,出生后的仔鼠分对照组和酒精组共计180只;采用透射电子显微镜、免疫荧光染色和免疫印迹技术观察P7、P14和P30仔鼠小脑普肯耶细胞自噬的发生.结果 电子显微镜下,模型组仔鼠小脑普肯耶细胞内出现较多自噬体或自噬溶酶体样结构,细胞器损伤严重.光镜下,可见模型组普肯耶细胞结构紊乱、胞体变小、树突分支减少、树突棘密度下降等一般形态学改变,模型组P7、P14自噬细胞数(PAC)及自噬指数(PAI)明显高于对照组(P<0.001),高剂量酒精组明显高于低剂量组 (P<0.001),P30各组间差别不明显(P>0.05);对照组间随着年龄的增长PAC及PAI值逐渐增高(F=58.29, P<0.001);Beclin-1免疫细胞化学染色结果与MAPLC3一致,两者在同一细胞中基本呈重叠表达.免疫印迹法检测各组间普肯耶细胞MAPLC3和Beclin-1蛋白的相对表达量与上述结果一致.结论 自噬参与了小脑普肯耶细胞的正常发育,在一定时期内,随着年龄的增长,自噬作用增强; 孕期酒精暴露能够导致仔鼠小脑普肯耶细胞自噬作用增强,且有剂量依赖性和长时程效应.
目的 探討孕期酒精暴露對仔鼠小腦普肯耶細胞自噬的影響.方法 從妊娠母鼠第5天酒精灌胃至仔鼠齣生,建立孕期酒精暴露動物模型,齣生後的仔鼠分對照組和酒精組共計180隻;採用透射電子顯微鏡、免疫熒光染色和免疫印跡技術觀察P7、P14和P30仔鼠小腦普肯耶細胞自噬的髮生.結果 電子顯微鏡下,模型組仔鼠小腦普肯耶細胞內齣現較多自噬體或自噬溶酶體樣結構,細胞器損傷嚴重.光鏡下,可見模型組普肯耶細胞結構紊亂、胞體變小、樹突分支減少、樹突棘密度下降等一般形態學改變,模型組P7、P14自噬細胞數(PAC)及自噬指數(PAI)明顯高于對照組(P<0.001),高劑量酒精組明顯高于低劑量組 (P<0.001),P30各組間差彆不明顯(P>0.05);對照組間隨著年齡的增長PAC及PAI值逐漸增高(F=58.29, P<0.001);Beclin-1免疫細胞化學染色結果與MAPLC3一緻,兩者在同一細胞中基本呈重疊錶達.免疫印跡法檢測各組間普肯耶細胞MAPLC3和Beclin-1蛋白的相對錶達量與上述結果一緻.結論 自噬參與瞭小腦普肯耶細胞的正常髮育,在一定時期內,隨著年齡的增長,自噬作用增彊; 孕期酒精暴露能夠導緻仔鼠小腦普肯耶細胞自噬作用增彊,且有劑量依賴性和長時程效應.
목적 탐토잉기주정폭로대자서소뇌보긍야세포자서적영향.방법 종임신모서제5천주정관위지자서출생,건립잉기주정폭로동물모형,출생후적자서분대조조화주정조공계180지;채용투사전자현미경、면역형광염색화면역인적기술관찰P7、P14화P30자서소뇌보긍야세포자서적발생.결과 전자현미경하,모형조자서소뇌보긍야세포내출현교다자서체혹자서용매체양결구,세포기손상엄중.광경하,가견모형조보긍야세포결구문란、포체변소、수돌분지감소、수돌극밀도하강등일반형태학개변,모형조P7、P14자서세포수(PAC)급자서지수(PAI)명현고우대조조(P<0.001),고제량주정조명현고우저제량조 (P<0.001),P30각조간차별불명현(P>0.05);대조조간수착년령적증장PAC급PAI치축점증고(F=58.29, P<0.001);Beclin-1면역세포화학염색결과여MAPLC3일치,량자재동일세포중기본정중첩표체.면역인적법검측각조간보긍야세포MAPLC3화Beclin-1단백적상대표체량여상술결과일치.결론 자서삼여료소뇌보긍야세포적정상발육,재일정시기내,수착년령적증장,자서작용증강; 잉기주정폭로능구도치자서소뇌보긍야세포자서작용증강,차유제량의뢰성화장시정효응.
