上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2010年
5期
402-407
,共6页
邓扬悟%王黎敏%张屹东%陈怡%黄丹枫
鄧颺悟%王黎敏%張屹東%陳怡%黃丹楓
산양오%왕려민%장흘동%진이%황단풍
谷氨酰胺合成酶%亚细胞定位%黄色荧光蛋白(YFP)%激光扫描共聚焦显微技术%洋葱内表皮细胞
穀氨酰胺閤成酶%亞細胞定位%黃色熒光蛋白(YFP)%激光掃描共聚焦顯微技術%洋蔥內錶皮細胞
곡안선알합성매%아세포정위%황색형광단백(YFP)%격광소묘공취초현미기술%양총내표피세포
在一级结构上的差异,使得植物中胞质型(GSJ)与质体型(GS2)谷氨酰胺合成酶(GS;EC 6.3.1.2)在生理水平上的作用及亚细胞结构中的定位不同.GSI通常定位于细胞质中,而GS2则多定位于细胞质体(叶绿体)中中.为了对课题组从甜瓜(Cucumismelo L.)中克隆到的首个胞质型(M-GSI,GenBank登录号:DQ851867)及质体型(M-GS2,GenBank登录号:AY773090)GS基因的表达产物进行亚细胞定位,本研究在对其进行生物信息学分析和定位预测的基础上,通过将其各自的编码区分别与定位报告基因--黄色荧光蛋白YFP即基因融合,构建重组植物表达载体(pA7-GS1-YFP和pA7-GS2-YFP),在基因枪轰击下转入洋葱内表皮细胞中瞬时表达,再用激光扫描共聚焦显微镜对各表达产物在洋葱内表皮细胞内的分布情况进行了观察和分析.2种手段分析结果均提示,M-GSI定位于细胞质中,而M-GS2则定位于细胞的质体中.对甜瓜谷氨酰胺合成酶进行精确亚细胞定位,为进一步探讨M-GSI和M-GS2在提高植物N素利用效率上的作用奠定了基础.
在一級結構上的差異,使得植物中胞質型(GSJ)與質體型(GS2)穀氨酰胺閤成酶(GS;EC 6.3.1.2)在生理水平上的作用及亞細胞結構中的定位不同.GSI通常定位于細胞質中,而GS2則多定位于細胞質體(葉綠體)中中.為瞭對課題組從甜瓜(Cucumismelo L.)中剋隆到的首箇胞質型(M-GSI,GenBank登錄號:DQ851867)及質體型(M-GS2,GenBank登錄號:AY773090)GS基因的錶達產物進行亞細胞定位,本研究在對其進行生物信息學分析和定位預測的基礎上,通過將其各自的編碼區分彆與定位報告基因--黃色熒光蛋白YFP即基因融閤,構建重組植物錶達載體(pA7-GS1-YFP和pA7-GS2-YFP),在基因鎗轟擊下轉入洋蔥內錶皮細胞中瞬時錶達,再用激光掃描共聚焦顯微鏡對各錶達產物在洋蔥內錶皮細胞內的分佈情況進行瞭觀察和分析.2種手段分析結果均提示,M-GSI定位于細胞質中,而M-GS2則定位于細胞的質體中.對甜瓜穀氨酰胺閤成酶進行精確亞細胞定位,為進一步探討M-GSI和M-GS2在提高植物N素利用效率上的作用奠定瞭基礎.
재일급결구상적차이,사득식물중포질형(GSJ)여질체형(GS2)곡안선알합성매(GS;EC 6.3.1.2)재생리수평상적작용급아세포결구중적정위불동.GSI통상정위우세포질중,이GS2칙다정위우세포질체(협록체)중중.위료대과제조종첨과(Cucumismelo L.)중극륭도적수개포질형(M-GSI,GenBank등록호:DQ851867)급질체형(M-GS2,GenBank등록호:AY773090)GS기인적표체산물진행아세포정위,본연구재대기진행생물신식학분석화정위예측적기출상,통과장기각자적편마구분별여정위보고기인--황색형광단백YFP즉기인융합,구건중조식물표체재체(pA7-GS1-YFP화pA7-GS2-YFP),재기인창굉격하전입양총내표피세포중순시표체,재용격광소묘공취초현미경대각표체산물재양총내표피세포내적분포정황진행료관찰화분석.2충수단분석결과균제시,M-GSI정위우세포질중,이M-GS2칙정위우세포적질체중.대첨과곡안선알합성매진행정학아세포정위,위진일보탐토M-GSI화M-GS2재제고식물N소이용효솔상적작용전정료기출.
