中西医结合心脑血管病杂志
中西醫結閤心腦血管病雜誌
중서의결합심뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATIVE MEDICINE ON CARDIO-/CEREBROVASCULAR DISEASE
2011年
6期
720-722
,共3页
RNA干扰%脑胶质瘤细胞U251%X连锁凋亡抑制蛋白
RNA榦擾%腦膠質瘤細胞U251%X連鎖凋亡抑製蛋白
RNA간우%뇌효질류세포U251%X련쇄조망억제단백
目的 采用RNA干扰技术(RNAi)抑制X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP),观察抑制前后人脑胶质瘤细胞U251的生物学行为.方法 DNA重组技术合成针对人脑胶质瘤U251细胞XIAP基因三条siRNA(siRNA1,siRNA2,siRNA3),以脂质体2000作为载体进行转染,RT-PCR法检测XIAP的mRNA表达,选择特异性较高的siRNA,以此 siRNA为标准建立20 nmol/L、30 nmol/L、50 nmol/L3个浓度梯度,转染细胞,Western blot 检测XIAP基因的蛋白表达,选出最低有效浓度;流式细胞仪检测抑制前后细胞周期和凋亡率.结果 siRNA成功转染了人脑胶质瘤细胞U251,转染率达到80%以上;RT-PCR检测siRNA2特异性较高;Western-blot检测终浓度为30 nmol/L的siRNA抑制效率较高;流式细胞仪检测停滞在G0/G1期的细胞增多,在S期的细胞减少,并且细胞的凋亡率增加.结论 通过RNA干扰可以抑制人脑胶质瘤U251细胞XIAP的表达,促进人脑胶质瘤细胞凋亡,从而抑制细胞的生长.
目的 採用RNA榦擾技術(RNAi)抑製X連鎖凋亡抑製蛋白(XIAP),觀察抑製前後人腦膠質瘤細胞U251的生物學行為.方法 DNA重組技術閤成針對人腦膠質瘤U251細胞XIAP基因三條siRNA(siRNA1,siRNA2,siRNA3),以脂質體2000作為載體進行轉染,RT-PCR法檢測XIAP的mRNA錶達,選擇特異性較高的siRNA,以此 siRNA為標準建立20 nmol/L、30 nmol/L、50 nmol/L3箇濃度梯度,轉染細胞,Western blot 檢測XIAP基因的蛋白錶達,選齣最低有效濃度;流式細胞儀檢測抑製前後細胞週期和凋亡率.結果 siRNA成功轉染瞭人腦膠質瘤細胞U251,轉染率達到80%以上;RT-PCR檢測siRNA2特異性較高;Western-blot檢測終濃度為30 nmol/L的siRNA抑製效率較高;流式細胞儀檢測停滯在G0/G1期的細胞增多,在S期的細胞減少,併且細胞的凋亡率增加.結論 通過RNA榦擾可以抑製人腦膠質瘤U251細胞XIAP的錶達,促進人腦膠質瘤細胞凋亡,從而抑製細胞的生長.
목적 채용RNA간우기술(RNAi)억제X련쇄조망억제단백(XIAP),관찰억제전후인뇌효질류세포U251적생물학행위.방법 DNA중조기술합성침대인뇌효질류U251세포XIAP기인삼조siRNA(siRNA1,siRNA2,siRNA3),이지질체2000작위재체진행전염,RT-PCR법검측XIAP적mRNA표체,선택특이성교고적siRNA,이차 siRNA위표준건립20 nmol/L、30 nmol/L、50 nmol/L3개농도제도,전염세포,Western blot 검측XIAP기인적단백표체,선출최저유효농도;류식세포의검측억제전후세포주기화조망솔.결과 siRNA성공전염료인뇌효질류세포U251,전염솔체도80%이상;RT-PCR검측siRNA2특이성교고;Western-blot검측종농도위30 nmol/L적siRNA억제효솔교고;류식세포의검측정체재G0/G1기적세포증다,재S기적세포감소,병차세포적조망솔증가.결론 통과RNA간우가이억제인뇌효질류U251세포XIAP적표체,촉진인뇌효질류세포조망,종이억제세포적생장.
