解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
6期
761-765
,共5页
胡晓芳%赖桂华%王乐禹%欧阳钧%余磊%邱小忠
鬍曉芳%賴桂華%王樂禹%歐暘鈞%餘磊%邱小忠
호효방%뢰계화%왕악우%구양균%여뢰%구소충
骨骼肌%凋亡诱导因子%Id2%迁移%分化%再生%免疫荧光%大鼠
骨骼肌%凋亡誘導因子%Id2%遷移%分化%再生%免疫熒光%大鼠
골격기%조망유도인자%Id2%천이%분화%재생%면역형광%대서
目的 探讨Id2在骨骼肌再生中的作用机制.方法 用绿色荧光蛋白(GFP)-Id2-C2表达载体转染C2C12成肌细胞,对转染组和非转染组进行H2O2处理和2%马血清处理,用RT-PCR法观察两组细胞Id2基因表达的差异;Western blotting观察两组细胞的成肌分化相关蛋白的表达情况;免疫荧光显微镜观察正常组、纤维损伤组以及去神经支配组大鼠的骨骼肌中Id2和凋亡诱导因子(AIF)蛋白的表达情况.结果 与非转染组相比,Id2转染组细胞成肌分化明显增强.免疫荧光染色法显示,50μmol/L H2O2能增加核Id2蛋白的表达.在氧化应激条件下,Id2能抑制成肌调节因子(MyoD)而活化肌浆蛋白(myogenin).2%马血清能引起大多数Id2从细胞核迁移到细胞质,从而抑制活性氧(ROS)诱导的线粒体AIF表达.免疫荧光分析显示,去神经支配组大鼠的骨骼肌中细胞内的Id2和AIF蛋白表达增多.结论 Id2从细胞核迁移到细胞质后能促进骨骼肌细胞分化,其作用与AIF表达水平相关.
目的 探討Id2在骨骼肌再生中的作用機製.方法 用綠色熒光蛋白(GFP)-Id2-C2錶達載體轉染C2C12成肌細胞,對轉染組和非轉染組進行H2O2處理和2%馬血清處理,用RT-PCR法觀察兩組細胞Id2基因錶達的差異;Western blotting觀察兩組細胞的成肌分化相關蛋白的錶達情況;免疫熒光顯微鏡觀察正常組、纖維損傷組以及去神經支配組大鼠的骨骼肌中Id2和凋亡誘導因子(AIF)蛋白的錶達情況.結果 與非轉染組相比,Id2轉染組細胞成肌分化明顯增彊.免疫熒光染色法顯示,50μmol/L H2O2能增加覈Id2蛋白的錶達.在氧化應激條件下,Id2能抑製成肌調節因子(MyoD)而活化肌漿蛋白(myogenin).2%馬血清能引起大多數Id2從細胞覈遷移到細胞質,從而抑製活性氧(ROS)誘導的線粒體AIF錶達.免疫熒光分析顯示,去神經支配組大鼠的骨骼肌中細胞內的Id2和AIF蛋白錶達增多.結論 Id2從細胞覈遷移到細胞質後能促進骨骼肌細胞分化,其作用與AIF錶達水平相關.
목적 탐토Id2재골격기재생중적작용궤제.방법 용록색형광단백(GFP)-Id2-C2표체재체전염C2C12성기세포,대전염조화비전염조진행H2O2처리화2%마혈청처리,용RT-PCR법관찰량조세포Id2기인표체적차이;Western blotting관찰량조세포적성기분화상관단백적표체정황;면역형광현미경관찰정상조、섬유손상조이급거신경지배조대서적골격기중Id2화조망유도인자(AIF)단백적표체정황.결과 여비전염조상비,Id2전염조세포성기분화명현증강.면역형광염색법현시,50μmol/L H2O2능증가핵Id2단백적표체.재양화응격조건하,Id2능억제성기조절인자(MyoD)이활화기장단백(myogenin).2%마혈청능인기대다수Id2종세포핵천이도세포질,종이억제활성양(ROS)유도적선립체AIF표체.면역형광분석현시,거신경지배조대서적골격기중세포내적Id2화AIF단백표체증다.결론 Id2종세포핵천이도세포질후능촉진골격기세포분화,기작용여AIF표체수평상관.
