CAJ | 학술논문

本研究旨在对山羊脂肪酸合酶基因(Fatty acid synthase,FASN)启动子进行结构与功能的初步分析,进而对其转录调控机制进行探讨.采用PCR技术从西农萨能羊基因组DNA中克隆FASN基因启动子,通过缺失分析,构建7个包含不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,转染山羊乳腺上皮细胞和MCF-7细胞,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动活性.结果表明,克隆得到FASN基因的启动调控序列2 589 bp,生物信息学分析发现,该启动子序列含有典型的启动转录元件TATA-box和E-box,分别位于转录起始位点(+1)上游-41和-74 bp处.报告基因分析表明,启动子核心区域定位在-293～-79 bp,在线软件预测发现,该区域含有Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子结合位点.结果显示,FASN基因启动子前端存在负调控元件,Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子可能参与FASN基因的转录调控.
본연구지재대산양지방산합매기인(Fatty acid synthase,FASN)계동자진행결구여공능적초보분석,진이대기전록조공궤제진행탐토.채용PCR기술종서농살능양기인조DNA중극륭FASN기인계동자,통과결실분석,구건7개포함불동결실편단적형광소매보고기인재체,전염산양유선상피세포화MCF-7세포,이용쌍형광소매계통검측불동편단적계동활성.결과표명,극륭득도FASN기인적계동조공서렬2 589 bp,생물신식학분석발현,해계동자서렬함유전형적계동전록원건TATA-box화E-box,분별위우전록기시위점(+1)상유-41화-74 bp처.보고기인분석표명,계동자핵심구역정위재-293～-79 bp,재선연건예측발현,해구역함유Sp1、NF-Y、USF화SREBP등전록인자결합위점.결과현시,FASN기인계동자전단존재부조공원건,Sp1、NF-Y、USF화SREBP등전록인자가능삼여FASN기인적전록조공.