中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2012年
2期
21-24
,共4页
李公美%李玉梅%胡静涛%刘可越%钱爱东
李公美%李玉梅%鬍靜濤%劉可越%錢愛東
리공미%리옥매%호정도%류가월%전애동
吉林白鹅%α干扰素%鹅细小病毒%抗病毒活性
吉林白鵝%α榦擾素%鵝細小病毒%抗病毒活性
길림백아%α간우소%아세소병독%항병독활성
用PCR方法扩增了吉林白鹅α干扰素(IFN-α)成熟肽编码序列,将IFN-α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX-IFN-α,将重组质粒转入大肠杆菌BL21( DE3)感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST-IFN-α).SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN-α融合蛋白(rGoIFN-α)的分子量大小约为43 ku,能与IFN-α抗血清发生特异性结合反应.重组吉林白鹅α干扰素经谷胱甘肽Sepharose-4B亲和柱层析纯化后,在鸭胚成纤维细胞上抗鹅细小病毒的活性为3.32×105 U/mg,本试验结果表明,该表达系统能够表达重组鹅α干扰素,且表达的重组鹅α干扰素具有一定的抗病毒活性.
用PCR方法擴增瞭吉林白鵝α榦擾素(IFN-α)成熟肽編碼序列,將IFN-α片段定嚮插入原覈錶達載體pGEX-6p-1中,構建重組質粒pGEX-IFN-α,將重組質粒轉入大腸桿菌BL21( DE3)感受態細胞裏,在IPTG誘導下錶達可溶性的融閤蛋白(GST-IFN-α).SDS-PAGE、Western-blot檢測結果錶明,重組吉林白鵝IFN-α融閤蛋白(rGoIFN-α)的分子量大小約為43 ku,能與IFN-α抗血清髮生特異性結閤反應.重組吉林白鵝α榦擾素經穀胱甘肽Sepharose-4B親和柱層析純化後,在鴨胚成纖維細胞上抗鵝細小病毒的活性為3.32×105 U/mg,本試驗結果錶明,該錶達繫統能夠錶達重組鵝α榦擾素,且錶達的重組鵝α榦擾素具有一定的抗病毒活性.
용PCR방법확증료길림백아α간우소(IFN-α)성숙태편마서렬,장IFN-α편단정향삽입원핵표체재체pGEX-6p-1중,구건중조질립pGEX-IFN-α,장중조질립전입대장간균BL21( DE3)감수태세포리,재IPTG유도하표체가용성적융합단백(GST-IFN-α).SDS-PAGE、Western-blot검측결과표명,중조길림백아IFN-α융합단백(rGoIFN-α)적분자량대소약위43 ku,능여IFN-α항혈청발생특이성결합반응.중조길림백아α간우소경곡광감태Sepharose-4B친화주층석순화후,재압배성섬유세포상항아세소병독적활성위3.32×105 U/mg,본시험결과표명,해표체계통능구표체중조아α간우소,차표체적중조아α간우소구유일정적항병독활성.