中国实验诊断学
中國實驗診斷學
중국실험진단학
CHINESE JOURNAL OF LABORATORY DIAGNOSIS
2008年
1期
12-15
,共4页
王刚%吕同德%马静%常雅萍
王剛%呂同德%馬靜%常雅萍
왕강%려동덕%마정%상아평
骨髓%间充质干细胞%细胞培养%鉴定%大鼠
骨髓%間充質榦細胞%細胞培養%鑒定%大鼠
골수%간충질간세포%세포배양%감정%대서
目的 通过建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离培养方法,探讨大鼠MSCs表型特征以及多向分化潜能.方法 利用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化Sd大鼠骨髓MSCs,传代扩增,进行形态学观察,测定生长曲线.免疫细胞组织化学及流式细胞分析检测细胞表面分子的表达.定向诱导MSCs向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化.结果 原代分离的MSCs在接种后48 h贴壁,细胞形态为椭圆形,多角形及短梭形,12天时细胞呈长梭形并达到90％单层融合.经传代扩增,细胞进一步纯化,细胞形态为均一的长梭形并呈漩涡状排列,而且生长速率加快,P1代细胞群体倍增时间为20.3 h.细胞免疫组化结果显示P2代细胞表面分子CD44、FN表达阳性,而CD14、CD34阴性,流式细胞检测CD44、FN阳性率分别为92.09％和90.55％.不同诱导剂定向诱导2周,经油红0、阿新兰及茜素红S染色鉴定,P3代MSCs分别向脂肪细胞,软骨细胞及成骨细胞分化.结论 通过密度梯度离心结合贴壁筛选方法,体外分离培养的大鼠骨髓MSC8具有很强的增殖能力,并保持稳定的表型特征及多向分化潜能.
目的 通過建立大鼠骨髓間充質榦細胞(MSCs)的體外分離培養方法,探討大鼠MSCs錶型特徵以及多嚮分化潛能.方法 利用密度梯度離心法結閤貼壁培養法分離純化Sd大鼠骨髓MSCs,傳代擴增,進行形態學觀察,測定生長麯線.免疫細胞組織化學及流式細胞分析檢測細胞錶麵分子的錶達.定嚮誘導MSCs嚮脂肪細胞、成骨細胞及軟骨細胞分化.結果 原代分離的MSCs在接種後48 h貼壁,細胞形態為橢圓形,多角形及短梭形,12天時細胞呈長梭形併達到90％單層融閤.經傳代擴增,細胞進一步純化,細胞形態為均一的長梭形併呈漩渦狀排列,而且生長速率加快,P1代細胞群體倍增時間為20.3 h.細胞免疫組化結果顯示P2代細胞錶麵分子CD44、FN錶達暘性,而CD14、CD34陰性,流式細胞檢測CD44、FN暘性率分彆為92.09％和90.55％.不同誘導劑定嚮誘導2週,經油紅0、阿新蘭及茜素紅S染色鑒定,P3代MSCs分彆嚮脂肪細胞,軟骨細胞及成骨細胞分化.結論 通過密度梯度離心結閤貼壁篩選方法,體外分離培養的大鼠骨髓MSC8具有很彊的增殖能力,併保持穩定的錶型特徵及多嚮分化潛能.
목적 통과건립대서골수간충질간세포(MSCs)적체외분리배양방법,탐토대서MSCs표형특정이급다향분화잠능.방법 이용밀도제도리심법결합첩벽배양법분리순화Sd대서골수MSCs,전대확증,진행형태학관찰,측정생장곡선.면역세포조직화학급류식세포분석검측세포표면분자적표체.정향유도MSCs향지방세포、성골세포급연골세포분화.결과 원대분리적MSCs재접충후48 h첩벽,세포형태위타원형,다각형급단사형,12천시세포정장사형병체도90％단층융합.경전대확증,세포진일보순화,세포형태위균일적장사형병정선와상배렬,이차생장속솔가쾌,P1대세포군체배증시간위20.3 h.세포면역조화결과현시P2대세포표면분자CD44、FN표체양성,이CD14、CD34음성,류식세포검측CD44、FN양성솔분별위92.09％화90.55％.불동유도제정향유도2주,경유홍0、아신란급천소홍S염색감정,P3대MSCs분별향지방세포,연골세포급성골세포분화.결론 통과밀도제도리심결합첩벽사선방법,체외분리배양적대서골수MSC8구유흔강적증식능력,병보지은정적표형특정급다향분화잠능.
