中国寄生虫学与寄生虫病杂志
中國寄生蟲學與寄生蟲病雜誌
중국기생충학여기생충병잡지
CHINESE JOURNAL OF PARASITOLOGY AND PARASITIC DISEASES
2008年
3期
174-178
,共5页
李静宜%田小军%黄勇%杨艳君%马巧荣%薛燕萍
李靜宜%田小軍%黃勇%楊豔君%馬巧榮%薛燕萍
리정의%전소군%황용%양염군%마교영%설연평
脑囊尾蚴病%脑脊液%蛋白质组%双向差异凝胶电泳
腦囊尾蚴病%腦脊液%蛋白質組%雙嚮差異凝膠電泳
뇌낭미유병%뇌척액%단백질조%쌍향차이응효전영
目的 建立脑脊液差异凝胶电泳方法,以获得高分辨率的荧光差异双向电泳图谱.方法 取确诊的4例脑囊尾蚴病患者脑脊液和4位健康人脑脊液,分别用冰丙酮沉淀法除盐提取蛋白,均等量混合后为脑囊尾蚴病组与健康人对照组,两组总蛋白等量混合为内标组.将各组蛋白分别经花青染料2(Cy2)、Cy3和Cy5标记,再进行单向十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和双向差异凝胶电泳(2-D DIGE),分别在波长488 nm、532nm和633nm激发光下扫描,所呈图像分别用ImageQuant和DeCyder 5.0图像分析软件进行蛋白表达差异分析.用DeCyder中的胶内差异分析(DIA)模块对2-D DIGE扫描图像进行蛋白质点检测和含量分析.用DeCyder中的生物学差异分析(BVA)模块分析两组蛋白表达的生物学差异.结果 ImageQuant分析结果表明,所有脑脊液全蛋白样品均能被Cy2、Cy3和Cy5标记,荧光强度随蛋白含量的上升而增强.DLA分析显示,胶1和胶2分别检测到896和894个蛋白质点.胶2与胶1进行匹配,蛋白质点匹配率达90%.BVA分析发现,在脑囊尾蚴病组与健康人组脑脊液蛋白共有表达量变化超过两倍的差异蛋白质点55个,其中在脑囊尾蚴病组中表达上调2倍的有47个蛋白质点,下调2倍以上的有8个蛋白质点.结论 以脑囊尾蚴病患者脑脊液建立的差异凝胶电泳方法,获得的2-D DIGE图谱,图像清晰,分辨率高,为脑囊尾蚴病蛋白质组学研究奠定了基础.
目的 建立腦脊液差異凝膠電泳方法,以穫得高分辨率的熒光差異雙嚮電泳圖譜.方法 取確診的4例腦囊尾蚴病患者腦脊液和4位健康人腦脊液,分彆用冰丙酮沉澱法除鹽提取蛋白,均等量混閤後為腦囊尾蚴病組與健康人對照組,兩組總蛋白等量混閤為內標組.將各組蛋白分彆經花青染料2(Cy2)、Cy3和Cy5標記,再進行單嚮十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和雙嚮差異凝膠電泳(2-D DIGE),分彆在波長488 nm、532nm和633nm激髮光下掃描,所呈圖像分彆用ImageQuant和DeCyder 5.0圖像分析軟件進行蛋白錶達差異分析.用DeCyder中的膠內差異分析(DIA)模塊對2-D DIGE掃描圖像進行蛋白質點檢測和含量分析.用DeCyder中的生物學差異分析(BVA)模塊分析兩組蛋白錶達的生物學差異.結果 ImageQuant分析結果錶明,所有腦脊液全蛋白樣品均能被Cy2、Cy3和Cy5標記,熒光彊度隨蛋白含量的上升而增彊.DLA分析顯示,膠1和膠2分彆檢測到896和894箇蛋白質點.膠2與膠1進行匹配,蛋白質點匹配率達90%.BVA分析髮現,在腦囊尾蚴病組與健康人組腦脊液蛋白共有錶達量變化超過兩倍的差異蛋白質點55箇,其中在腦囊尾蚴病組中錶達上調2倍的有47箇蛋白質點,下調2倍以上的有8箇蛋白質點.結論 以腦囊尾蚴病患者腦脊液建立的差異凝膠電泳方法,穫得的2-D DIGE圖譜,圖像清晰,分辨率高,為腦囊尾蚴病蛋白質組學研究奠定瞭基礎.
목적 건립뇌척액차이응효전영방법,이획득고분변솔적형광차이쌍향전영도보.방법 취학진적4례뇌낭미유병환자뇌척액화4위건강인뇌척액,분별용빙병동침정법제염제취단백,균등량혼합후위뇌낭미유병조여건강인대조조,량조총단백등량혼합위내표조.장각조단백분별경화청염료2(Cy2)、Cy3화Cy5표기,재진행단향십이완기류산납-취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화쌍향차이응효전영(2-D DIGE),분별재파장488 nm、532nm화633nm격발광하소묘,소정도상분별용ImageQuant화DeCyder 5.0도상분석연건진행단백표체차이분석.용DeCyder중적효내차이분석(DIA)모괴대2-D DIGE소묘도상진행단백질점검측화함량분석.용DeCyder중적생물학차이분석(BVA)모괴분석량조단백표체적생물학차이.결과 ImageQuant분석결과표명,소유뇌척액전단백양품균능피Cy2、Cy3화Cy5표기,형광강도수단백함량적상승이증강.DLA분석현시,효1화효2분별검측도896화894개단백질점.효2여효1진행필배,단백질점필배솔체90%.BVA분석발현,재뇌낭미유병조여건강인조뇌척액단백공유표체량변화초과량배적차이단백질점55개,기중재뇌낭미유병조중표체상조2배적유47개단백질점,하조2배이상적유8개단백질점.결론 이뇌낭미유병환자뇌척액건립적차이응효전영방법,획득적2-D DIGE도보,도상청석,분변솔고,위뇌낭미유병단백질조학연구전정료기출.
