中国组织化学与细胞化学杂志
中國組織化學與細胞化學雜誌
중국조직화학여세포화학잡지
CHINESE JOURNAL OF HISTOCHEMISY AND CYTOCHEMISY
2008年
5期
401-406
,共6页
王珊珊%阮秋蓉%孟寒%余俊%许梅%黄冠%陈雪
王珊珊%阮鞦蓉%孟寒%餘俊%許梅%黃冠%陳雪
왕산산%원추용%맹한%여준%허매%황관%진설
骨髓问充质干细胞%平滑肌样细胞%分化%促血管平滑肌细胞分化因子%平滑肌分化标志物基因
骨髓問充質榦細胞%平滑肌樣細胞%分化%促血管平滑肌細胞分化因子%平滑肌分化標誌物基因
골수문충질간세포%평활기양세포%분화%촉혈관평활기세포분화인자%평활기분화표지물기인
目的 在用血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)联合20%胎牛血清(FBS)诱导骨髓问充质干细胞(BM-SC)向平滑肌细胞(SMC)分化过程中,通过对促血管SMC分化因子myoeardin和平滑肌分化标志物基因α-actin,SM-22等表达的研究,探讨myocardin在促血管SMC分化中的重要作用.方法 采用骨髓干细胞培养基和贴壁法从小鼠骨髓中分离BMSC,然后细胞分为两组,诱导其向SMC分化:(1)20%FBS单独诱导;(2)PDGF-BB(50ng/m1)联合20%FBS诱导BMSC.分别于诱导0d,4d,8d,12d后用逆转录一聚合酶链反应法(reverse transcription polyrnerase chain reaction,RT-PER)和免疫组化法检测细胞myoeardin,α-actin,SM-22的mRNA表达和蛋白表达情况.结果 RT-PCR和免疫组化结果显不在对小鼠BMSC的诱导过程中,检测出了myocardin,同时还有平滑肌分化标志物基因α-actin,SM-22等的表达.0d,4d,8d两诱导组细胞的rnyocardin,α-actin,SM-22的mRNA和蛋白表达水平随着诱导时问延长而增强(P<0.05),而诱导8d及12d 时表达基本趋于稳定,与SMC相比无明显统计学差异(P>0.05);并且各项指标的表达水平在PDGF-BB与20%FBS联合诱导时比20%FBS单独诱导表达增强.不同诱导组之间统计学比较有差异(P<0.05).结论 PDGF-BB联合20%FBS可有效诱导BMSC向SMC分化,myocardin在此过程中起着关键性作用,且PDGF-BB,20%FBS两者联合诱导比20%FBS单独诱导作刷要强.
目的 在用血小闆源性生長因子-BB(PDGF-BB)聯閤20%胎牛血清(FBS)誘導骨髓問充質榦細胞(BM-SC)嚮平滑肌細胞(SMC)分化過程中,通過對促血管SMC分化因子myoeardin和平滑肌分化標誌物基因α-actin,SM-22等錶達的研究,探討myocardin在促血管SMC分化中的重要作用.方法 採用骨髓榦細胞培養基和貼壁法從小鼠骨髓中分離BMSC,然後細胞分為兩組,誘導其嚮SMC分化:(1)20%FBS單獨誘導;(2)PDGF-BB(50ng/m1)聯閤20%FBS誘導BMSC.分彆于誘導0d,4d,8d,12d後用逆轉錄一聚閤酶鏈反應法(reverse transcription polyrnerase chain reaction,RT-PER)和免疫組化法檢測細胞myoeardin,α-actin,SM-22的mRNA錶達和蛋白錶達情況.結果 RT-PCR和免疫組化結果顯不在對小鼠BMSC的誘導過程中,檢測齣瞭myocardin,同時還有平滑肌分化標誌物基因α-actin,SM-22等的錶達.0d,4d,8d兩誘導組細胞的rnyocardin,α-actin,SM-22的mRNA和蛋白錶達水平隨著誘導時問延長而增彊(P<0.05),而誘導8d及12d 時錶達基本趨于穩定,與SMC相比無明顯統計學差異(P>0.05);併且各項指標的錶達水平在PDGF-BB與20%FBS聯閤誘導時比20%FBS單獨誘導錶達增彊.不同誘導組之間統計學比較有差異(P<0.05).結論 PDGF-BB聯閤20%FBS可有效誘導BMSC嚮SMC分化,myocardin在此過程中起著關鍵性作用,且PDGF-BB,20%FBS兩者聯閤誘導比20%FBS單獨誘導作刷要彊.
목적 재용혈소판원성생장인자-BB(PDGF-BB)연합20%태우혈청(FBS)유도골수문충질간세포(BM-SC)향평활기세포(SMC)분화과정중,통과대촉혈관SMC분화인자myoeardin화평활기분화표지물기인α-actin,SM-22등표체적연구,탐토myocardin재촉혈관SMC분화중적중요작용.방법 채용골수간세포배양기화첩벽법종소서골수중분리BMSC,연후세포분위량조,유도기향SMC분화:(1)20%FBS단독유도;(2)PDGF-BB(50ng/m1)연합20%FBS유도BMSC.분별우유도0d,4d,8d,12d후용역전록일취합매련반응법(reverse transcription polyrnerase chain reaction,RT-PER)화면역조화법검측세포myoeardin,α-actin,SM-22적mRNA표체화단백표체정황.결과 RT-PCR화면역조화결과현불재대소서BMSC적유도과정중,검측출료myocardin,동시환유평활기분화표지물기인α-actin,SM-22등적표체.0d,4d,8d량유도조세포적rnyocardin,α-actin,SM-22적mRNA화단백표체수평수착유도시문연장이증강(P<0.05),이유도8d급12d 시표체기본추우은정,여SMC상비무명현통계학차이(P>0.05);병차각항지표적표체수평재PDGF-BB여20%FBS연합유도시비20%FBS단독유도표체증강.불동유도조지간통계학비교유차이(P<0.05).결론 PDGF-BB연합20%FBS가유효유도BMSC향SMC분화,myocardin재차과정중기착관건성작용,차PDGF-BB,20%FBS량자연합유도비20%FBS단독유도작쇄요강.
