军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2009年
3期
220-223
,共4页
高原%马延%毛赟赟%李玉霞%凌焱%张京生%周围%梁龙
高原%馬延%毛赟赟%李玉霞%凌焱%張京生%週圍%樑龍
고원%마연%모빈빈%리옥하%릉염%장경생%주위%량룡
大肠杆菌O157%H7%z3672基因%基因表达%Ⅲ型分泌系统
大腸桿菌O157%H7%z3672基因%基因錶達%Ⅲ型分泌繫統
대장간균O157%H7%z3672기인%기인표체%Ⅲ형분비계통
目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌EHEC O157:H7新预测毒力蛋白Z3672,以进一步开展其结构与功能的研究.方法:利用PCR方法从EHEC O157:H7基因组中扩增出基因z3672,构建重组表达质粒,经测序证实后,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现诱导表达,采用质谱分析法和Western印迹试验进行鉴定,通过洗涤包涵体纯化目的蛋白.结果:构建了pET-24a-z3672重组质粒,经酶切及测序鉴定与预期序列一致,实现了目的蛋白的融合表达,并且对蛋白条带的质谱分析证实了表达蛋白即为Z3672蛋白.纯化后目的蛋白的纯度90%.结论:得到了新预测的毒力蛋白Z3672,为下一步研究蛋白功能,并进一步研究EHEC O157:H7的致病机制奠定了基础.
目的:剋隆、錶達併純化腸齣血性大腸桿菌EHEC O157:H7新預測毒力蛋白Z3672,以進一步開展其結構與功能的研究.方法:利用PCR方法從EHEC O157:H7基因組中擴增齣基因z3672,構建重組錶達質粒,經測序證實後,在大腸桿菌BL21(DE3)中實現誘導錶達,採用質譜分析法和Western印跡試驗進行鑒定,通過洗滌包涵體純化目的蛋白.結果:構建瞭pET-24a-z3672重組質粒,經酶切及測序鑒定與預期序列一緻,實現瞭目的蛋白的融閤錶達,併且對蛋白條帶的質譜分析證實瞭錶達蛋白即為Z3672蛋白.純化後目的蛋白的純度90%.結論:得到瞭新預測的毒力蛋白Z3672,為下一步研究蛋白功能,併進一步研究EHEC O157:H7的緻病機製奠定瞭基礎.
목적:극륭、표체병순화장출혈성대장간균EHEC O157:H7신예측독력단백Z3672,이진일보개전기결구여공능적연구.방법:이용PCR방법종EHEC O157:H7기인조중확증출기인z3672,구건중조표체질립,경측서증실후,재대장간균BL21(DE3)중실현유도표체,채용질보분석법화Western인적시험진행감정,통과세조포함체순화목적단백.결과:구건료pET-24a-z3672중조질립,경매절급측서감정여예기서렬일치,실현료목적단백적융합표체,병차대단백조대적질보분석증실료표체단백즉위Z3672단백.순화후목적단백적순도90%.결론:득도료신예측적독력단백Z3672,위하일보연구단백공능,병진일보연구EHEC O157:H7적치병궤제전정료기출.
