畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
5期
9-15
,共7页
任宇%马玉珍%王清莲%刘东军%仓明%温建勋%靳木子
任宇%馬玉珍%王清蓮%劉東軍%倉明%溫建勛%靳木子
임우%마옥진%왕청련%류동군%창명%온건훈%근목자
骨髓间充质干细胞%脂肪间充质干细胞%体外培养%成骨诱导%细胞鉴定
骨髓間充質榦細胞%脂肪間充質榦細胞%體外培養%成骨誘導%細胞鑒定
골수간충질간세포%지방간충질간세포%체외배양%성골유도%세포감정
本研究旨在观察不同代次骨髓间充质干细胞(BMSCs)和脂肪间充质干细胞(ADSCs)体外培养的生长特点和体外诱导成骨能力.通过密度梯度离心和贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞,用含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的培养液定向诱导传代细胞向成骨细胞分化,并利用茜素红染色、碱性磷酸酶染色及PCR方法检测成骨细胞.结果表明骨髓及脂肪间充质干细胞呈成纤维细胞样生长,增殖能力强,生长迅速.第5、10、15、20代BMSCs及ADSCs经诱导培养后茜素红染色呈阳性并且出现"矿化"、碱性磷酸酶活性强,随着细胞代次的递增,诱导后细胞碱性磷酸酶活性呈递减趋势;诱导后的两类细胞传代后细胞仍能继续分化,并形成正常的"矿化"结节,且碱性磷酸酶染色均弱于初次诱导.结果提示,BMSCs及ADSCs易于分离培养及体外扩增,诱导条件下成骨能力强且成骨细胞传代培养仍具有成骨能力,适合作为再生医学骨组织工程的种子细胞.
本研究旨在觀察不同代次骨髓間充質榦細胞(BMSCs)和脂肪間充質榦細胞(ADSCs)體外培養的生長特點和體外誘導成骨能力.通過密度梯度離心和貼壁培養法分離培養大鼠骨髓間充質榦細胞和脂肪間充質榦細胞,用含地塞米鬆、抗壞血痠、β-甘油燐痠鈉的培養液定嚮誘導傳代細胞嚮成骨細胞分化,併利用茜素紅染色、堿性燐痠酶染色及PCR方法檢測成骨細胞.結果錶明骨髓及脂肪間充質榦細胞呈成纖維細胞樣生長,增殖能力彊,生長迅速.第5、10、15、20代BMSCs及ADSCs經誘導培養後茜素紅染色呈暘性併且齣現"礦化"、堿性燐痠酶活性彊,隨著細胞代次的遞增,誘導後細胞堿性燐痠酶活性呈遞減趨勢;誘導後的兩類細胞傳代後細胞仍能繼續分化,併形成正常的"礦化"結節,且堿性燐痠酶染色均弱于初次誘導.結果提示,BMSCs及ADSCs易于分離培養及體外擴增,誘導條件下成骨能力彊且成骨細胞傳代培養仍具有成骨能力,適閤作為再生醫學骨組織工程的種子細胞.
본연구지재관찰불동대차골수간충질간세포(BMSCs)화지방간충질간세포(ADSCs)체외배양적생장특점화체외유도성골능력.통과밀도제도리심화첩벽배양법분리배양대서골수간충질간세포화지방간충질간세포,용함지새미송、항배혈산、β-감유린산납적배양액정향유도전대세포향성골세포분화,병이용천소홍염색、감성린산매염색급PCR방법검측성골세포.결과표명골수급지방간충질간세포정성섬유세포양생장,증식능력강,생장신속.제5、10、15、20대BMSCs급ADSCs경유도배양후천소홍염색정양성병차출현"광화"、감성린산매활성강,수착세포대차적체증,유도후세포감성린산매활성정체감추세;유도후적량류세포전대후세포잉능계속분화,병형성정상적"광화"결절,차감성린산매염색균약우초차유도.결과제시,BMSCs급ADSCs역우분리배양급체외확증,유도조건하성골능력강차성골세포전대배양잉구유성골능력,괄합작위재생의학골조직공정적충자세포.
