扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2011年
2期
16-20
,共5页
孔桂美%张小荣%黄瑶%高巍%廖月霞%卜平
孔桂美%張小榮%黃瑤%高巍%廖月霞%蔔平
공계미%장소영%황요%고외%료월하%복평
血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ%单克隆抗体%生物学活性
血管內皮細胞生長因子受體Ⅱ%單剋隆抗體%生物學活性
혈관내피세포생장인자수체Ⅱ%단극륭항체%생물학활성
根据GenBank中发表的血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体Ⅱ(KDR)基因序列,设计1对引物经RT-PCR从人脐静脉内皮细胞中克隆出KDR胞外Ⅲ区(KDRD3)编码序列,克隆入原核表达载体pGEX-6P1.重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG于37℃条件下诱导,经SDS-PAGE和Western blotting分析,表达出的融合蛋白大小为33.4 ku.利用纯化的重组融合蛋白免疫BALB/c小鼠,经淋巴细胞杂交瘤技术筛选获得2株KDR特异性单克隆抗体C4和F6.2株单抗均能特异性识别HUVEC细胞表达的天然KDR分子,HUVEC迁移抑制试验和HUVEC体外血管形成抑制试验结果显示,2株单抗均能特异性阻断血管内皮细胞生长因子与KDR分子的相互作用.结果表明:所获得的2株单抗对KDR具有良好的特异性和中和活性.
根據GenBank中髮錶的血管內皮細胞生長因子(VEGF)受體Ⅱ(KDR)基因序列,設計1對引物經RT-PCR從人臍靜脈內皮細胞中剋隆齣KDR胞外Ⅲ區(KDRD3)編碼序列,剋隆入原覈錶達載體pGEX-6P1.重組質粒轉化大腸桿菌BL21,用IPTG于37℃條件下誘導,經SDS-PAGE和Western blotting分析,錶達齣的融閤蛋白大小為33.4 ku.利用純化的重組融閤蛋白免疫BALB/c小鼠,經淋巴細胞雜交瘤技術篩選穫得2株KDR特異性單剋隆抗體C4和F6.2株單抗均能特異性識彆HUVEC細胞錶達的天然KDR分子,HUVEC遷移抑製試驗和HUVEC體外血管形成抑製試驗結果顯示,2株單抗均能特異性阻斷血管內皮細胞生長因子與KDR分子的相互作用.結果錶明:所穫得的2株單抗對KDR具有良好的特異性和中和活性.
근거GenBank중발표적혈관내피세포생장인자(VEGF)수체Ⅱ(KDR)기인서렬,설계1대인물경RT-PCR종인제정맥내피세포중극륭출KDR포외Ⅲ구(KDRD3)편마서렬,극륭입원핵표체재체pGEX-6P1.중조질립전화대장간균BL21,용IPTG우37℃조건하유도,경SDS-PAGE화Western blotting분석,표체출적융합단백대소위33.4 ku.이용순화적중조융합단백면역BALB/c소서,경림파세포잡교류기술사선획득2주KDR특이성단극륭항체C4화F6.2주단항균능특이성식별HUVEC세포표체적천연KDR분자,HUVEC천이억제시험화HUVEC체외혈관형성억제시험결과현시,2주단항균능특이성조단혈관내피세포생장인자여KDR분자적상호작용.결과표명:소획득적2주단항대KDR구유량호적특이성화중화활성.
