军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2004年
4期
304-307
,共4页
张树卓%武文%何滢%翁谢川%郑建全
張樹卓%武文%何瀅%翁謝川%鄭建全
장수탁%무문%하형%옹사천%정건전
NMDA受体%HEK-293细胞%膜片钳术%脂质体
NMDA受體%HEK-293細胞%膜片鉗術%脂質體
NMDA수체%HEK-293세포%막편겸술%지질체
目的:建立表达大鼠NMDA(N-methyl-D-aspartate)受体NR1a与NR2A亚单位重组体的细胞模型,研究其生物学及药理学特性.方法:利用脂质体转染方法将大鼠NR1a与NR2A亚单位重组体共转染到HEK-293细胞中,在细胞培养48～72 h后,利用膜片钳全细胞记录技术,观察和分析L-谷氨酸诱发的NMDA受体电流.结果:向转染后的HEK-293细胞表面喷射NMDA受体激动剂L-谷氨酸可在38%细胞上诱发出瞬时内向电流,该电流可被NMDA受体选择性拮抗剂D-AP5(50 μmol/L)完全阻断.L-谷氨酸诱发的电流具有快速失敏的动力学特征和内向整流特性,衰减时间常数(τ值)为(53±9)ms(n=20).L-谷氨酸诱发电流的EC50值为(8.5±0.5)μmol/L.结论:成功地将NR1a与NR2A亚单位转染入HEK-293细胞并形成NMDA受体的功能性表达,为进一步深入研究NMDA受体不同亚单位组成与其功能的关系及其药理学特性奠定了基础.
目的:建立錶達大鼠NMDA(N-methyl-D-aspartate)受體NR1a與NR2A亞單位重組體的細胞模型,研究其生物學及藥理學特性.方法:利用脂質體轉染方法將大鼠NR1a與NR2A亞單位重組體共轉染到HEK-293細胞中,在細胞培養48～72 h後,利用膜片鉗全細胞記錄技術,觀察和分析L-穀氨痠誘髮的NMDA受體電流.結果:嚮轉染後的HEK-293細胞錶麵噴射NMDA受體激動劑L-穀氨痠可在38%細胞上誘髮齣瞬時內嚮電流,該電流可被NMDA受體選擇性拮抗劑D-AP5(50 μmol/L)完全阻斷.L-穀氨痠誘髮的電流具有快速失敏的動力學特徵和內嚮整流特性,衰減時間常數(τ值)為(53±9)ms(n=20).L-穀氨痠誘髮電流的EC50值為(8.5±0.5)μmol/L.結論:成功地將NR1a與NR2A亞單位轉染入HEK-293細胞併形成NMDA受體的功能性錶達,為進一步深入研究NMDA受體不同亞單位組成與其功能的關繫及其藥理學特性奠定瞭基礎.
목적:건립표체대서NMDA(N-methyl-D-aspartate)수체NR1a여NR2A아단위중조체적세포모형,연구기생물학급약이학특성.방법:이용지질체전염방법장대서NR1a여NR2A아단위중조체공전염도HEK-293세포중,재세포배양48～72 h후,이용막편겸전세포기록기술,관찰화분석L-곡안산유발적NMDA수체전류.결과:향전염후적HEK-293세포표면분사NMDA수체격동제L-곡안산가재38%세포상유발출순시내향전류,해전류가피NMDA수체선택성길항제D-AP5(50 μmol/L)완전조단.L-곡안산유발적전류구유쾌속실민적동역학특정화내향정류특성,쇠감시간상수(τ치)위(53±9)ms(n=20).L-곡안산유발전류적EC50치위(8.5±0.5)μmol/L.결론:성공지장NR1a여NR2A아단위전염입HEK-293세포병형성NMDA수체적공능성표체,위진일보심입연구NMDA수체불동아단위조성여기공능적관계급기약이학특성전정료기출.
