HCV核蛋白羧基端信号肽基因缺失突变体的构建、鉴定和真核表达
HCV핵단백최기단신호태기인결실돌변체적구건、감정화진핵표체
Expression of a C-terminal deleted mutant of hepatitis C virus core protein in P815 cell line
  • 万方数据
    世界华人消化杂志 세계화인소화잡지
    WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
    2005年 7期 852-855 ,共4页

    洪沙%黄长形%杨为松%陈红梅%李光玉%王平忠%陈伟红%张岩%李羽

    홍사%황장형%양위송%진홍매%리광옥%왕평충%진위홍%장암%리우

    丙型肝炎病毒%核蛋白%P815细胞%羧基末端缺失 丙型肝炎病毒%覈蛋白%P815細胞%羧基末耑缺失
    병형간염병독%핵단백%P815세포%최기말단결실
    目的:构建羧基末端缺失核蛋白的真核表达载体并在小鼠肥大细胞瘤细胞株P815细胞中表达.方法:用RT-PCR方法从西安地区丙型肝炎患者血清中扩增HCV C区及部分E1区基因并进行克隆、测序,以此为模板扩增羧基末端缺失突变核蛋白基因片段(C507),将其定向克隆入真核表达载体pCI-neo中并转染P815细胞,经间接免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜检测细胞中突变核蛋白(P169)的表达.结果:从患者血清中成功克隆出HCV C cDNA,构建了编码羧基末端缺失核蛋白的重组质粒pCI-507,并经酶切鉴定和测序证实;间接免疫荧光染色表明P169主要在P815细胞胞质中表达,少数可见于细胞核内.结论:重组体pCI-507构建正确,其表达产物P169在P815中得到有效表达,为在此基础上的DNA免疫研究提供了实验依据.
    목적:구건최기말단결실핵단백적진핵표체재체병재소서비대세포류세포주P815세포중표체.방법:용RT-PCR방법종서안지구병형간염환자혈청중확증HCV C구급부분E1구기인병진행극륭、측서,이차위모판확증최기말단결실돌변핵단백기인편단(C507),장기정향극륭입진핵표체재체pCI-neo중병전염P815세포,경간접면역형광염색、격광공취초현미경검측세포중돌변핵단백(P169)적표체.결과:종환자혈청중성공극륭출HCV C cDNA,구건료편마최기말단결실핵단백적중조질립pCI-507,병경매절감정화측서증실;간접면역형광염색표명P169주요재P815세포포질중표체,소수가견우세포핵내.결론:중조체pCI-507구건정학,기표체산물P169재P815중득도유효표체,위재차기출상적DNA면역연구제공료실험의거.
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