山东大学学报（理学版）
山東大學學報（理學版）
산동대학학보（이학판）
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2005年
6期
107-111,116
,共6页
邵红莲%赵小凡%董杜鹃%扈进冬%邵丁丁%杨晓梅%王金星
邵紅蓮%趙小凡%董杜鵑%扈進鼕%邵丁丁%楊曉梅%王金星
소홍련%조소범%동두견%호진동%소정정%양효매%왕금성
棉铃虫%组织蛋白酶B%杆状病毒-昆虫细胞表达系统%转染%基因重组表达
棉鈴蟲%組織蛋白酶B%桿狀病毒-昆蟲細胞錶達繫統%轉染%基因重組錶達
면령충%조직단백매B%간상병독-곤충세포표체계통%전염%기인중조표체
以棉铃虫(helicoverpa armigera)组织蛋白酶B作外源基因重组构建克隆载体,自重组菌株HCB-DH10Bad、Histag-HCB-DH10Bac中提取穿梭质粒,脂质体法转染草地贪夜蛾卵巢细胞系Sf21细胞,转染液再感染细胞,收集感染3～4 d的上清液,提取芽生病毒的DNA,PCR法鉴定外源HCB基因,感染上清进行SDS-PAGE、Western-blotting、蛋白酶活性检测.结果:感染上清中的芽生病毒的DNA作模板扩增出预期的1 700bp片段,SDS-PAGE、Western-blotting检测均在28ku处有明显表达产物,且表达产物有蛋白水解活性.
以棉鈴蟲(helicoverpa armigera)組織蛋白酶B作外源基因重組構建剋隆載體,自重組菌株HCB-DH10Bad、Histag-HCB-DH10Bac中提取穿梭質粒,脂質體法轉染草地貪夜蛾卵巢細胞繫Sf21細胞,轉染液再感染細胞,收集感染3～4 d的上清液,提取芽生病毒的DNA,PCR法鑒定外源HCB基因,感染上清進行SDS-PAGE、Western-blotting、蛋白酶活性檢測.結果:感染上清中的芽生病毒的DNA作模闆擴增齣預期的1 700bp片段,SDS-PAGE、Western-blotting檢測均在28ku處有明顯錶達產物,且錶達產物有蛋白水解活性.
이면령충(helicoverpa armigera)조직단백매B작외원기인중조구건극륭재체,자중조균주HCB-DH10Bad、Histag-HCB-DH10Bac중제취천사질립,지질체법전염초지탐야아란소세포계Sf21세포,전염액재감염세포,수집감염3～4 d적상청액,제취아생병독적DNA,PCR법감정외원HCB기인,감염상청진행SDS-PAGE、Western-blotting、단백매활성검측.결과:감염상청중적아생병독적DNA작모판확증출예기적1 700bp편단,SDS-PAGE、Western-blotting검측균재28ku처유명현표체산물,차표체산물유단백수해활성.
