CAJ | 학술논문

目的:建立微电流作用于角朊细胞的体外模型,观察微电流对角朊细胞增殖等细胞行为的影响.方法:实验于2003-08/2004-08在第三军医大学烧伤研究所实验室完成.所用细胞来自西南医院泌尿外科3例行包皮环切术患者的手术切除包皮标本,患者均知情同意,每个标本均独立进行实验,分为对照组和电刺激组.模型建立:在细胞培养皿中部组建3.0 cm×1.0 cm×1.0 cm大小的培养小室,底部分别用镍铬合金丝或纯铂丝作为电极,同时自行制作输出电流范围为4～1800?A的微电流发生器.电刺激后观察两种电极周围是否发生影响细胞生长的副反应,选择未发生副反应的电极应用于模型中.把手术切除的包皮皮片用中性蛋白酶和胰蛋白酶消化以获取角朊细胞,精制无血清培养基培养.电刺激组给予一定强度频率和时间脉冲交流电刺激后,用碘化丙啶染色,选流式细胞术分析两组角朊细胞周期变化.结果:①镍铬电极的培养模型,制作比较复杂,电极周围易发生通电引起的副反应,电刺激1 d后,电极附近生出淡绿色电解反应产物;纯铂电极的培养模型,制作过程相对简单,持续7 d电刺激后,电极周围无化学反应,该模型选用了纯铂电极.②自制的微电流发生器输出功率稳定,电流强度可在4.0～1 800?A之间调节.③角朊细胞DNA合成前期对照组比电刺激组所占百分率明显降低[(52.76±3.57)%,(46.63 ±0.38)%,t=2.953,P＜0.05];合成期、合成后期和分裂期电刺激组所占百分率稍高于对照组[(29.54±16.27)%,(27.02±18.27)%;(23.84±16.48)%,(20.21±17.90)%],说明该组角朊细胞DNA合成活跃,细胞分裂数目增多.④在纯铂电极的培养模型中,电刺激4 d后,角朊细胞呈多角形,核分裂相多见,细胞生长旺盛,在小室中的融合现象更加明显.结论:微电流刺激下,角朊细胞DNA的合成活跃,细胞分裂数目增多.自制纯铂电极培养模型输出功率稳定,电流强度可控,能满足细胞长期电刺激培养的需要,为进一步研究电流对细胞增殖的影响提供了技术平台. 目的:建立微電流作用于角朊細胞的體外模型,觀察微電流對角朊細胞增殖等細胞行為的影響.方法:實驗于2003-08/2004-08在第三軍醫大學燒傷研究所實驗室完成.所用細胞來自西南醫院泌尿外科3例行包皮環切術患者的手術切除包皮標本,患者均知情同意,每箇標本均獨立進行實驗,分為對照組和電刺激組.模型建立:在細胞培養皿中部組建3.0 cm×1.0 cm×1.0 cm大小的培養小室,底部分彆用鎳鉻閤金絲或純鉑絲作為電極,同時自行製作輸齣電流範圍為4～1800?A的微電流髮生器.電刺激後觀察兩種電極週圍是否髮生影響細胞生長的副反應,選擇未髮生副反應的電極應用于模型中.把手術切除的包皮皮片用中性蛋白酶和胰蛋白酶消化以穫取角朊細胞,精製無血清培養基培養.電刺激組給予一定彊度頻率和時間脈遲交流電刺激後,用碘化丙啶染色,選流式細胞術分析兩組角朊細胞週期變化.結果:①鎳鉻電極的培養模型,製作比較複雜,電極週圍易髮生通電引起的副反應,電刺激1 d後,電極附近生齣淡綠色電解反應產物;純鉑電極的培養模型,製作過程相對簡單,持續7 d電刺激後,電極週圍無化學反應,該模型選用瞭純鉑電極.②自製的微電流髮生器輸齣功率穩定,電流彊度可在4.0～1 800?A之間調節.③角朊細胞DNA閤成前期對照組比電刺激組所佔百分率明顯降低[(52.76±3.57)%,(46.63 ±0.38)%,t=2.953,P＜0.05];閤成期、閤成後期和分裂期電刺激組所佔百分率稍高于對照組[(29.54±16.27)%,(27.02±18.27)%;(23.84±16.48)%,(20.21±17.90)%],說明該組角朊細胞DNA閤成活躍,細胞分裂數目增多.④在純鉑電極的培養模型中,電刺激4 d後,角朊細胞呈多角形,覈分裂相多見,細胞生長旺盛,在小室中的融閤現象更加明顯.結論:微電流刺激下,角朊細胞DNA的閤成活躍,細胞分裂數目增多.自製純鉑電極培養模型輸齣功率穩定,電流彊度可控,能滿足細胞長期電刺激培養的需要,為進一步研究電流對細胞增殖的影響提供瞭技術平檯.
목적:건립미전류작용우각원세포적체외모형,관찰미전류대각원세포증식등세포행위적영향.방법:실험우2003-08/2004-08재제삼군의대학소상연구소실험실완성.소용세포래자서남의원비뇨외과3례행포피배절술환자적수술절제포피표본,환자균지정동의,매개표본균독립진행실험,분위대조조화전자격조.모형건립:재세포배양명중부조건3.0 cm×1.0 cm×1.0 cm대소적배양소실,저부분별용얼락합금사혹순박사작위전겁,동시자행제작수출전류범위위4～1800?A적미전류발생기.전자격후관찰량충전겁주위시부발생영향세포생장적부반응,선택미발생부반응적전겁응용우모형중.파수술절제적포피피편용중성단백매화이단백매소화이획취각원세포,정제무혈청배양기배양.전자격조급여일정강도빈솔화시간맥충교류전자격후,용전화병정염색,선류식세포술분석량조각원세포주기변화.결과:①얼락전겁적배양모형,제작비교복잡,전겁주위역발생통전인기적부반응,전자격1 d후,전겁부근생출담록색전해반응산물;순박전겁적배양모형,제작과정상대간단,지속7 d전자격후,전겁주위무화학반응,해모형선용료순박전겁.②자제적미전류발생기수출공솔은정,전류강도가재4.0～1 800?A지간조절.③각원세포DNA합성전기대조조비전자격조소점백분솔명현강저[(52.76±3.57)%,(46.63 ±0.38)%,t=2.953,P＜0.05];합성기、합성후기화분렬기전자격조소점백분솔초고우대조조[(29.54±16.27)%,(27.02±18.27)%;(23.84±16.48)%,(20.21±17.90)%],설명해조각원세포DNA합성활약,세포분렬수목증다.④재순박전겁적배양모형중,전자격4 d후,각원세포정다각형,핵분렬상다견,세포생장왕성,재소실중적융합현상경가명현.결론:미전류자격하,각원세포DNA적합성활약,세포분렬수목증다.자제순박전겁배양모형수출공솔은정,전류강도가공,능만족세포장기전자격배양적수요,위진일보연구전류대세포증식적영향제공료기술평태.