中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2009年
3期
251-254,270
,共5页
方芳%马吉春%高航%赵小霞%周静%宋献美%柳忠辉%台桂香
方芳%馬吉春%高航%趙小霞%週靜%宋獻美%柳忠輝%檯桂香
방방%마길춘%고항%조소하%주정%송헌미%류충휘%태계향
鼠Muc1%Muc1-MBP融合蛋白%CTL活性%异种同源蛋白%肿瘤疫苗
鼠Muc1%Muc1-MBP融閤蛋白%CTL活性%異種同源蛋白%腫瘤疫苗
서Muc1%Muc1-MBP융합단백%CTL활성%이충동원단백%종류역묘
目的:制备鼠Muc1-MBP融合蛋白,探讨其免疫活性.方法:将pMAL-Muc1转化大肠杆菌,通过IFTG诱导、SDS-PAGE和Western blot鉴定Mucl的表达,Amylose resin亲和层析纯化Muc1-MBP.将Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠,采用ELISA方法检测小鼠血清Muc1特异性抗体的水平;MTT法测定小鼠抗Muc1特异的CTL活性;ELISPOT法测定脾脏淋巴细胞IFN-γ的分泌.结果:获得稳定表达Muc1的菌株,制备了分子量67 kD较纯的Muc1-MBP融合蛋白.Muc1-MBP融合蛋白免疫小鼠产生高效价Muc1特异抗体,效价在8 000~16 000之间,Muc1-MBP融合蛋白可诱导CTL杀伤活性,对人乳腺癌MCF-7和小鼠Lewis肺癌LLC1靶细胞的杀伤率分别为(74.5±5.9)%和(60.5±10.4)%,与对照组比P<0.05,差异显著;Mucl.MBP融合蛋白免疫可诱导脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ,特异性活化Th1细胞.结论:成功制备莺组鼠Muc1-MBP融合蛋白,其不仅能诱导特异体液免疫应答,而且可诱导细胞免疫应答,尤其能诱导对人类MCF-7细胞较小鼠lewis肺癌LLC1细胞更加强烈的CTL杀伤活性,提示异种同源蛋白疫苗具有比同源蛋白疫苗更好的抗肿瘤作用.
目的:製備鼠Muc1-MBP融閤蛋白,探討其免疫活性.方法:將pMAL-Muc1轉化大腸桿菌,通過IFTG誘導、SDS-PAGE和Western blot鑒定Mucl的錶達,Amylose resin親和層析純化Muc1-MBP.將Muc1-MBP融閤蛋白免疫小鼠,採用ELISA方法檢測小鼠血清Muc1特異性抗體的水平;MTT法測定小鼠抗Muc1特異的CTL活性;ELISPOT法測定脾髒淋巴細胞IFN-γ的分泌.結果:穫得穩定錶達Muc1的菌株,製備瞭分子量67 kD較純的Muc1-MBP融閤蛋白.Muc1-MBP融閤蛋白免疫小鼠產生高效價Muc1特異抗體,效價在8 000~16 000之間,Muc1-MBP融閤蛋白可誘導CTL殺傷活性,對人乳腺癌MCF-7和小鼠Lewis肺癌LLC1靶細胞的殺傷率分彆為(74.5±5.9)%和(60.5±10.4)%,與對照組比P<0.05,差異顯著;Mucl.MBP融閤蛋白免疫可誘導脾髒淋巴細胞分泌IFN-γ,特異性活化Th1細胞.結論:成功製備鶯組鼠Muc1-MBP融閤蛋白,其不僅能誘導特異體液免疫應答,而且可誘導細胞免疫應答,尤其能誘導對人類MCF-7細胞較小鼠lewis肺癌LLC1細胞更加彊烈的CTL殺傷活性,提示異種同源蛋白疫苗具有比同源蛋白疫苗更好的抗腫瘤作用.
목적:제비서Muc1-MBP융합단백,탐토기면역활성.방법:장pMAL-Muc1전화대장간균,통과IFTG유도、SDS-PAGE화Western blot감정Mucl적표체,Amylose resin친화층석순화Muc1-MBP.장Muc1-MBP융합단백면역소서,채용ELISA방법검측소서혈청Muc1특이성항체적수평;MTT법측정소서항Muc1특이적CTL활성;ELISPOT법측정비장림파세포IFN-γ적분비.결과:획득은정표체Muc1적균주,제비료분자량67 kD교순적Muc1-MBP융합단백.Muc1-MBP융합단백면역소서산생고효개Muc1특이항체,효개재8 000~16 000지간,Muc1-MBP융합단백가유도CTL살상활성,대인유선암MCF-7화소서Lewis폐암LLC1파세포적살상솔분별위(74.5±5.9)%화(60.5±10.4)%,여대조조비P<0.05,차이현저;Mucl.MBP융합단백면역가유도비장림파세포분비IFN-γ,특이성활화Th1세포.결론:성공제비앵조서Muc1-MBP융합단백,기불부능유도특이체액면역응답,이차가유도세포면역응답,우기능유도대인류MCF-7세포교소서lewis폐암LLC1세포경가강렬적CTL살상활성,제시이충동원단백역묘구유비동원단백역묘경호적항종류작용.
