CAJ | 학술논문

为了优化小鼠黑质双向凝胶电泳(2-DE)技术,比较了不同样品预处理方法、不同胶条和不同上样量对凝胶电泳结果的影响.研究发现,两种样品预处理方法均可顺利升至最高等电聚焦(IEF)电压(10 000 V).与Clean-up kit法相比,TAC/丙酮沉淀法预处理后蛋白得率较低,同时丢失了样品中的部分中、小分子蛋白质.pH3-10 L胶条中蛋白点主要分布在中间区域;pH3-10 NL胶条对中间区域的蛋白点的分离有所改善;pH4-7胶条中蛋白点分布均匀,横条纹较少.80μg上样量的图谱背景干净,但点数最少(411);180μg上样量的图谱蛋白点较多(883),且圆润、清晰,背景干净,分辨率高;300μg上样量的图谱蛋白点虽然最多(904),但背景较深,部分蛋白点融合,横条纹也较多.研究表明,对于小鼠黑质蛋白质,使用Clean-up kit法对样品进行预处理,选取pH4-7的胶条,采用180μg的上样量能获得背景干净、分辨率高的双向电泳图谱,为帕金森病的生物标志物和药物靶点的研究打下了基础.
위료우화소서흑질쌍향응효전영(2-DE)기술,비교료불동양품예처리방법、불동효조화불동상양량대응효전영결과적영향.연구발현,량충양품예처리방법균가순리승지최고등전취초(IEF)전압(10 000 V).여Clean-up kit법상비,TAC/병동침정법예처리후단백득솔교저,동시주실료양품중적부분중、소분자단백질.pH3-10 L효조중단백점주요분포재중간구역;pH3-10 NL효조대중간구역적단백점적분리유소개선;pH4-7효조중단백점분포균균,횡조문교소.80μg상양량적도보배경간정,단점수최소(411);180μg상양량적도보단백점교다(883),차원윤、청석,배경간정,분변솔고;300μg상양량적도보단백점수연최다(904),단배경교심,부분단백점융합,횡조문야교다.연구표명,대우소서흑질단백질,사용Clean-up kit법대양품진행예처리,선취pH4-7적효조,채용180μg적상양량능획득배경간정、분변솔고적쌍향전영도보,위파금삼병적생물표지물화약물파점적연구타하료기출.