中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2011年
10期
867-870
,共4页
王玉珍%谢基明%王宁飞%刘帅
王玉珍%謝基明%王寧飛%劉帥
왕옥진%사기명%왕저비%류수
poly I:C%Rab7%IFN-β%TNF-α%TLR3
poly I:C%Rab7%IFN-β%TNF-α%TLR3
poly I:C%Rab7%IFN-β%TNF-α%TLR3
目的:通过构建Rab7的失活突变载体tRab7(Rab7T22N),研究Rab7失活突变后对poly I:C诱导的RAW264.7巨噬细胞中细胞因子的影响.方法:利用PCR定点突变法构建Rab7的失活突变载体Rab7T22N,将Rab7的真核表达载体及其突变体tRab7通过脂质体法瞬时转染RAW264.7细胞,通过Western blot方法检测Rab7的表达情况.poly I:C刺激转染细胞不同时间后检测细胞因子IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的表达变化.结果:Western blot检测结果显示,与转染空质粒的对照细胞相比,转染Rab7和tRab7的细胞中Rab7的蛋白水平显著增高.Rab7过表达后,抑制了巨噬细胞RAW264.7中poly I:C刺激后IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的产生,而Rab7失活突变体tRab7(Rab7T22N)过表达后显著促进了IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的表达.结论:Rab7抑制了poly I:C刺激的巨噬细胞中IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的表达,该抑制作用依赖于其GTP结合活性.本研究为进一步阐明Rab7在TLR3信号转导通路中的作用奠定了基础.
目的:通過構建Rab7的失活突變載體tRab7(Rab7T22N),研究Rab7失活突變後對poly I:C誘導的RAW264.7巨噬細胞中細胞因子的影響.方法:利用PCR定點突變法構建Rab7的失活突變載體Rab7T22N,將Rab7的真覈錶達載體及其突變體tRab7通過脂質體法瞬時轉染RAW264.7細胞,通過Western blot方法檢測Rab7的錶達情況.poly I:C刺激轉染細胞不同時間後檢測細胞因子IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的錶達變化.結果:Western blot檢測結果顯示,與轉染空質粒的對照細胞相比,轉染Rab7和tRab7的細胞中Rab7的蛋白水平顯著增高.Rab7過錶達後,抑製瞭巨噬細胞RAW264.7中poly I:C刺激後IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的產生,而Rab7失活突變體tRab7(Rab7T22N)過錶達後顯著促進瞭IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的錶達.結論:Rab7抑製瞭poly I:C刺激的巨噬細胞中IFN-β、IP10、TNF-α和IL-1β的錶達,該抑製作用依賴于其GTP結閤活性.本研究為進一步闡明Rab7在TLR3信號轉導通路中的作用奠定瞭基礎.
목적:통과구건Rab7적실활돌변재체tRab7(Rab7T22N),연구Rab7실활돌변후대poly I:C유도적RAW264.7거서세포중세포인자적영향.방법:이용PCR정점돌변법구건Rab7적실활돌변재체Rab7T22N,장Rab7적진핵표체재체급기돌변체tRab7통과지질체법순시전염RAW264.7세포,통과Western blot방법검측Rab7적표체정황.poly I:C자격전염세포불동시간후검측세포인자IFN-β、IP10、TNF-α화IL-1β적표체변화.결과:Western blot검측결과현시,여전염공질립적대조세포상비,전염Rab7화tRab7적세포중Rab7적단백수평현저증고.Rab7과표체후,억제료거서세포RAW264.7중poly I:C자격후IFN-β、IP10、TNF-α화IL-1β적산생,이Rab7실활돌변체tRab7(Rab7T22N)과표체후현저촉진료IFN-β、IP10、TNF-α화IL-1β적표체.결론:Rab7억제료poly I:C자격적거서세포중IFN-β、IP10、TNF-α화IL-1β적표체,해억제작용의뢰우기GTP결합활성.본연구위진일보천명Rab7재TLR3신호전도통로중적작용전정료기출.
