中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2011年
22期
162-166
,共5页
翟文慧%贾春枫%周莹%黄金宝%刘凡%严红
翟文慧%賈春楓%週瑩%黃金寶%劉凡%嚴紅
적문혜%가춘풍%주형%황금보%류범%엄홍
十字花科蔬菜黑腐病%Xanthomonas campestris%AFLP
十字花科蔬菜黑腐病%Xanthomonas campestris%AFLP
십자화과소채흑부병%Xanthomonas campestris%AFLP
以英国华威大学收集的十字花科蔬菜黑腐病菌野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris pv.campestris)的6个生理小种菌株为材料,优化了该类菌种的AFLP分析体系包括DNA的提取、MseⅠ/EcoRⅠ酶切时间、扩增反应体系的组成及染色方法等步骤,建立了一套适于该菌种的AFLP分析体系.该体系中各最优因素为:酶切体系为50 μL,模板DNA用量为600 ng,酶切体系中Mse Ⅰ和EcoR Ⅰ各加入5U,酶切温度为37℃,反应时间为4～6 h；预扩增产物稀释10倍进行选择性扩增；检测方法为银染法,银染液中硝酸银含量为8g/L且染色时间是15 min时效果最佳,该体系的建立为该类菌种的分子水平遗传多样性研究提供了技术支撑.
以英國華威大學收集的十字花科蔬菜黑腐病菌野油菜黃單胞菌野油菜緻病變種(Xanthomonas campestris pv.campestris)的6箇生理小種菌株為材料,優化瞭該類菌種的AFLP分析體繫包括DNA的提取、MseⅠ/EcoRⅠ酶切時間、擴增反應體繫的組成及染色方法等步驟,建立瞭一套適于該菌種的AFLP分析體繫.該體繫中各最優因素為:酶切體繫為50 μL,模闆DNA用量為600 ng,酶切體繫中Mse Ⅰ和EcoR Ⅰ各加入5U,酶切溫度為37℃,反應時間為4～6 h；預擴增產物稀釋10倍進行選擇性擴增；檢測方法為銀染法,銀染液中硝痠銀含量為8g/L且染色時間是15 min時效果最佳,該體繫的建立為該類菌種的分子水平遺傳多樣性研究提供瞭技術支撐.
이영국화위대학수집적십자화과소채흑부병균야유채황단포균야유채치병변충(Xanthomonas campestris pv.campestris)적6개생리소충균주위재료,우화료해류균충적AFLP분석체계포괄DNA적제취、MseⅠ/EcoRⅠ매절시간、확증반응체계적조성급염색방법등보취,건립료일투괄우해균충적AFLP분석체계.해체계중각최우인소위:매절체계위50 μL,모판DNA용량위600 ng,매절체계중Mse Ⅰ화EcoR Ⅰ각가입5U,매절온도위37℃,반응시간위4～6 h；예확증산물희석10배진행선택성확증；검측방법위은염법,은염액중초산은함량위8g/L차염색시간시15 min시효과최가,해체계적건립위해류균충적분자수평유전다양성연구제공료기술지탱.
