中国基层医药
中國基層醫藥
중국기층의약
CHINESE JOURNAL OF PRIMARY MEDICINE AND PHARMACY
2005年
6期
726-728
,共3页
尹为华%马雅%余光银%李若馨%孙来保
尹為華%馬雅%餘光銀%李若馨%孫來保
윤위화%마아%여광은%리약형%손래보
RNA%反义%细胞凋亡%肺肿瘤%逆转录聚合酶链反应%流式细胞术%荧光免疫测定
RNA%反義%細胞凋亡%肺腫瘤%逆轉錄聚閤酶鏈反應%流式細胞術%熒光免疫測定
RNA%반의%세포조망%폐종류%역전록취합매련반응%류식세포술%형광면역측정
目的研究反义hTERT基因体外诱导肺癌细胞凋亡.方法体外通过SuperFect(QIAGEN)转染正、反义hTERT真核表达载体至人肺腺癌细胞株GLC-82,再经过G418及PCR筛选鉴定获得分别转入了正、反义hTERT载体的抗性克隆细胞GLC-82-s和GLC-82-as.然后采用MTT法、双层软琼脂克隆形成试验、流式细胞术观察和分析了反义hTERT对肺癌细胞体外生长增殖活力的影响及是否能诱导瘤细胞的凋亡;同时还运用实时荧光定量RT-PCR技术及TRAP-银染法对各组细胞内源性hTERT mRNA的表达情况及端粒酶的活性进行了检测.结果当各组细胞传至第25代后,与GLC-82、GLC-82-s比较,GLC-82-as细胞的生长速度和集落形成能力明显地减慢和降低,同时伴有凋亡率的显著增加;与空白对照、正义hTERT组相比,反义hTERT能显著地降低GLC-82细胞内源性hTERT mRNA的表达(P＜0.01)和下调端粒酶活性.结论反义hTERT体外确实能明显地诱导肺癌细胞的凋亡及抑制瘤细胞的生长增殖能力.
目的研究反義hTERT基因體外誘導肺癌細胞凋亡.方法體外通過SuperFect(QIAGEN)轉染正、反義hTERT真覈錶達載體至人肺腺癌細胞株GLC-82,再經過G418及PCR篩選鑒定穫得分彆轉入瞭正、反義hTERT載體的抗性剋隆細胞GLC-82-s和GLC-82-as.然後採用MTT法、雙層軟瓊脂剋隆形成試驗、流式細胞術觀察和分析瞭反義hTERT對肺癌細胞體外生長增殖活力的影響及是否能誘導瘤細胞的凋亡;同時還運用實時熒光定量RT-PCR技術及TRAP-銀染法對各組細胞內源性hTERT mRNA的錶達情況及耑粒酶的活性進行瞭檢測.結果噹各組細胞傳至第25代後,與GLC-82、GLC-82-s比較,GLC-82-as細胞的生長速度和集落形成能力明顯地減慢和降低,同時伴有凋亡率的顯著增加;與空白對照、正義hTERT組相比,反義hTERT能顯著地降低GLC-82細胞內源性hTERT mRNA的錶達(P＜0.01)和下調耑粒酶活性.結論反義hTERT體外確實能明顯地誘導肺癌細胞的凋亡及抑製瘤細胞的生長增殖能力.
목적연구반의hTERT기인체외유도폐암세포조망.방법체외통과SuperFect(QIAGEN)전염정、반의hTERT진핵표체재체지인폐선암세포주GLC-82,재경과G418급PCR사선감정획득분별전입료정、반의hTERT재체적항성극륭세포GLC-82-s화GLC-82-as.연후채용MTT법、쌍층연경지극륭형성시험、류식세포술관찰화분석료반의hTERT대폐암세포체외생장증식활력적영향급시부능유도류세포적조망;동시환운용실시형광정량RT-PCR기술급TRAP-은염법대각조세포내원성hTERT mRNA적표체정황급단립매적활성진행료검측.결과당각조세포전지제25대후,여GLC-82、GLC-82-s비교,GLC-82-as세포적생장속도화집락형성능력명현지감만화강저,동시반유조망솔적현저증가;여공백대조、정의hTERT조상비,반의hTERT능현저지강저GLC-82세포내원성hTERT mRNA적표체(P＜0.01)화하조단립매활성.결론반의hTERT체외학실능명현지유도폐암세포적조망급억제류세포적생장증식능력.
