实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2012年
15期
1147-1150
,共4页
陶红芳%徐之良%江毅%石清照%夏利平%陆军
陶紅芳%徐之良%江毅%石清照%夏利平%陸軍
도홍방%서지량%강의%석청조%하리평%륙군
Survivin%短发夹RNA干扰%急性淋巴细胞白血病%化疗
Survivin%短髮夾RNA榦擾%急性淋巴細胞白血病%化療
Survivin%단발협RNA간우%급성림파세포백혈병%화료
目的 研究应用短发夹RNA( shRNA)技术缄默Survivin基因表达后对白血病细胞株Jurkat细胞凋亡及对化疗药物敏感性的影响.方法 构建shRNA-Survivin重组质粒,电击转染至Jurkat细胞,G418筛选得到稳定表达重组质粒的细胞系,反转录(RT)-PCR检测转染细胞中Survivin mRNA表达水平变化,化疗药物长春新碱(VCR)及柔红霉素(DNR)分别作用各转染组细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定各组细胞的增殖抑制率,流式细胞术测定药物对各组细胞的凋亡效应.结果 DNA测序证实表达质粒构建成功,RT-PCR检测结果显示重组质粒能明显抑制Jurkat细胞Survivin mRNA表达,与对照组及阴性质粒转染组比较,差异均有统计学意义(Pa＜0.05).VCR及DNR作用转染细胞后,可有效抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡,与对照组及阴性质粒转染组比较,差异均有统计学意义(Pa＜0.05).结论 Survivin基因对Jurkat细胞生长有重要作用,转染shRNA-Survivin表达质粒能有效抑制细胞Survivin mRNA表达,缄默Survivin基因表达的细胞对化疗药物的敏感性显著增高.
目的 研究應用短髮夾RNA( shRNA)技術緘默Survivin基因錶達後對白血病細胞株Jurkat細胞凋亡及對化療藥物敏感性的影響.方法 構建shRNA-Survivin重組質粒,電擊轉染至Jurkat細胞,G418篩選得到穩定錶達重組質粒的細胞繫,反轉錄(RT)-PCR檢測轉染細胞中Survivin mRNA錶達水平變化,化療藥物長春新堿(VCR)及柔紅黴素(DNR)分彆作用各轉染組細胞,四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法測定各組細胞的增殖抑製率,流式細胞術測定藥物對各組細胞的凋亡效應.結果 DNA測序證實錶達質粒構建成功,RT-PCR檢測結果顯示重組質粒能明顯抑製Jurkat細胞Survivin mRNA錶達,與對照組及陰性質粒轉染組比較,差異均有統計學意義(Pa＜0.05).VCR及DNR作用轉染細胞後,可有效抑製細胞增殖及誘導細胞凋亡,與對照組及陰性質粒轉染組比較,差異均有統計學意義(Pa＜0.05).結論 Survivin基因對Jurkat細胞生長有重要作用,轉染shRNA-Survivin錶達質粒能有效抑製細胞Survivin mRNA錶達,緘默Survivin基因錶達的細胞對化療藥物的敏感性顯著增高.
목적 연구응용단발협RNA( shRNA)기술함묵Survivin기인표체후대백혈병세포주Jurkat세포조망급대화료약물민감성적영향.방법 구건shRNA-Survivin중조질립,전격전염지Jurkat세포,G418사선득도은정표체중조질립적세포계,반전록(RT)-PCR검측전염세포중Survivin mRNA표체수평변화,화료약물장춘신감(VCR)급유홍매소(DNR)분별작용각전염조세포,사갑기우담서람(MTT)비색법측정각조세포적증식억제솔,류식세포술측정약물대각조세포적조망효응.결과 DNA측서증실표체질립구건성공,RT-PCR검측결과현시중조질립능명현억제Jurkat세포Survivin mRNA표체,여대조조급음성질립전염조비교,차이균유통계학의의(Pa＜0.05).VCR급DNR작용전염세포후,가유효억제세포증식급유도세포조망,여대조조급음성질립전염조비교,차이균유통계학의의(Pa＜0.05).결론 Survivin기인대Jurkat세포생장유중요작용,전염shRNA-Survivin표체질립능유효억제세포Survivin mRNA표체,함묵Survivin기인표체적세포대화료약물적민감성현저증고.
